【摘 要】
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目的:通过构建鼠源的敲低HS3ST2基因的短发夹RNA(shRNA),分别转染入大鼠生长激素型垂体腺瘤GH3细胞系,进一步通过细胞实验深入研究基因HS3ST2在GH腺瘤中的作用,探索该基因对G
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目的:通过构建鼠源的敲低HS3ST2基因的短发夹RNA(shRNA),分别转染入大鼠生长激素型垂体腺瘤GH3细胞系,进一步通过细胞实验深入研究基因HS3ST2在GH腺瘤中的作用,探索该基因对GH腺瘤生长增殖、凋亡及激素分泌过程中的影响。方法:该实验构建了鼠源的敲低HS3ST2基因的短发夹RNA(shRNA),分别转染入大鼠生长激素型垂体腺瘤GH3细胞系,通过RT-qPCR测量转染前后HS3ST2基因在GH3细胞中的表达水平。采用cck-8法分别测定转染24h、48h、72h及96h后各组GH3细胞活力。在转染72 h后,用ELISA法检测各组GH3细胞上清中GH和IGF-1的分泌水平。通过细胞流式检测转染72h后,各组GH3细胞凋亡的相对水平。结果:GH3细胞中HS3ST2的表达降低时,该细胞的增殖活性降低(P<0.05),GH3细胞分泌GH(P<0.05)和IGF-1(P<0.05)也均有所降低,而细胞凋亡比例有所增高但不明显,在细胞凋亡的晚期,细胞凋亡的比例增高相对早期更加明显。结论:基因HS3ST2可能促进GH垂体腺瘤的发生和发展,并延缓或减少肿瘤细胞的凋亡,其主要作用节点可能在细胞的晚期凋亡阶段。本研究仅仅通过体外实验证实HS3ST2基因对GH3细胞的一些影响,需要我们进一步探索研究其作用通路的影响,以及通过动物实验研究HS3ST2基因在GH腺瘤中的作用,来说明该基因是GH垂体腺瘤发生和发展的关键基因。
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