【摘 要】
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研究背景和目的hn RNP K蛋白与众多癌基因及生长因子有密切的关系,大量研究发现mi RNA作为抑癌基因或原癌基因参与了胃癌的发生发展。本研究探讨mi RNA与hn RNP K之间的关系,致力于为mi RNA和hn RNP K在胃癌中的机制研究提供新的观点。研究方法1.免疫组化和Western Blot技术分别检测正常胃组织和胃癌组织中hn RNP K的表达;芯片初筛高表达hn RNP K的胃癌
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研究背景和目的hn RNP K蛋白与众多癌基因及生长因子有密切的关系,大量研究发现mi RNA作为抑癌基因或原癌基因参与了胃癌的发生发展。本研究探讨mi RNA与hn RNP K之间的关系,致力于为mi RNA和hn RNP K在胃癌中的机制研究提供新的观点。研究方法1.免疫组化和Western Blot技术分别检测正常胃组织和胃癌组织中hn RNP K的表达;芯片初筛高表达hn RNP K的胃癌细胞中mi RNA表达谱;Real time q-PCR进行验证;2.TCGA数据库收集胃癌m RNA和mi RNA的表达数据,筛选hn RNP K高表达对应的差异表达mi RNA;TCGA数据库与芯片交互分析共表达mi RNA谱,Real time q-PCR验证;3.构建hn RNP K过表达和敲除细胞,Western Blot检验效果,并以Real time q-PCR验证mi R-20a的表达;TCGA数据分析胃癌组织中mi R-20a与hn RNP K的相关性。研究结果1.胃癌组织和细胞中hn RNP K蛋白高表达;芯片初筛14种mi RNA上调,7种下调;Real time q-PCR显示上调超过2倍的mi RNA有13个;2.TCGA数据库和细胞芯片交互分析共表达的mi RNA谱(mi R-17/20a/24/182),Real time q-PCR在组织中进行检测,发现仅有mi R-20a/182上调;3.构建hn RNP K过表达和敲除细胞体系,Western Blot和Real time q-PCR结果显示hn RNP K蛋白过表达,仅有mi R-20a显著上调;敲减hn RNP K,mi R-20a显著下调;TCGA数据分析显示胃癌组织中hn RNP K m RNA与mi R-20a弱相关性,且在胃癌中mi R-20a上调。研究结论1.在胃癌组织和细胞中hn RNP K存在高表达;且胃癌细胞中高表达的hn RNP K与mi RNA存在共表达;2.发现胃癌细胞中hn RNP K蛋白可上调mi R-20a的表达。
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