【摘 要】
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油棕的果实含油量极高,占干重质量可达90%,被誉为“世界油王”,长链脂肪酰基 CoA 合成酶(long chain long-chain acyl-CoA synthetase,LACS)将游离的脂肪酸活化,生成脂肪酰基
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油棕的果实含油量极高,占干重质量可达90%,被誉为“世界油王”,长链脂肪酰基 CoA 合成酶(long chain long-chain acyl-CoA synthetase,LACS)将游离的脂肪酸活化,生成脂肪酰基CoA,进而在高等植物的油脂合成和降解途径中发挥重要的功能。在本研究中,我们成功从油棕中克隆到了油棕LACS蛋白家族中的基因EgLACS1和EgLACS9。这些克隆都包含一个高度保守AMP结合域,一个ACS信号基序和一个特殊的连接区域。进化树显示,EgLACS1与AtLACS1,BnLACS1和AhLACS1属于同一个分支,主要参与植物的超长链脂肪酸(VLCFA)合成蜡和角质,这也说明EgLACS1可能参与了油脂的合成。EgLACS9和AtLACS9,BnLACS9和GmLACS9等属于同一个分支,主要参与质体到内质网的转运。酵母互补实验证明了EgLACS 和EgLACS9编码的长链脂肪酰基辅酶A合成酶能够补偿酵母YB525由于缺乏Faa1和Faa4编码蛋白而失去的功能。浅蓝菌素作用的条件下,在培养基中分别添加棕榈酸(C16:0)、硬脂酸(C18:0)或油酸(C18:1),EgLACS1转化子明显提高了酵母生长速率,但对这些脂肪酸底物的利用没有明显的偏好。为了进一步确定EgLACS1和EgLACS9的吸收功能,我们用C18的脂肪酸荧光类似物来取代外源脂肪酸,这个实验进一步完善了互补实验的结果。结果显示,EgLACS1和EgLACS9酵母内的荧光强度显著高于阴性对照,表明EgLACS1和EgLACS9可以吸收外源脂肪酸。本研究实验结果说明EgLACS1和EgLACS9与油棕的油脂代谢有关,具有活化游离脂肪酸以及吸收外源脂肪酸的功能,为今后针对油棕进行遗传改良获得高油品以及特定脂肪酸提供了分子靶标。
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