骨髓间充质干细胞移植对博莱霉素致肺纤维化小鼠干预效应的研究

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目的:观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植对博莱霉素致肺纤维化小鼠的干预效应并探讨其治疗肺纤维化的作用机制。方法:体外分离及培养6-8周龄雄性ICR小鼠的骨髓间充质干细胞。150只6-8周龄雌性ICR小鼠随机分为如下3组,即:阴性对照组(NC组),阳性对照组(PC组),BMSCs干预组。NC组于气管内注入PBS50ul,PC组及BMSCs干预组按6ug/g剂量经鼻气管内滴入博莱霉素50ul一次性给药制备肺纤维化模型,BMSCs组于造模后24小时经尾静脉注射MSC1×107/ml,200ul。各组小鼠分别于造模后第3、7、14、28天处死5只小鼠,处死前称取小鼠体重,处死后称取肺组织湿重并留取肺组织行HE、MASSON染色及羟脯氨酸含量测定;提取肺组织的DNA检测雄鼠的性别决定基因(Sry基因);提取肺组织RNA以检测SP-CmRNA、AQP5mRNA表达情况。结果:1、肺系数:PC组及BMSCs组各时间点肺系数均较NC组稍高,但除第3天外,BMSCs组较PC组明显降低。2、肺组织病理:BMSCs组在第7天以后肺泡炎较PC组明显减轻,第14天以后肺纤维化程度较PC组明显减轻。3、HYP含量:第3、7天三组HYP含量无明显差异,14天、28天时PC组与BMSCs干预组均较NC组升高,但BMSCs干预组低于PC组。4、sry基因检测:BMSCs干预组各时间点均可以检测到雄性小鼠的sry基因。5、肺组织SP-C mRNA表达情况:PC组及BMSCs干预组在各时间点的SP-C mRNA表达均低于NC组,除第7天外,BMSCs干预组SP-C mRNA表达量相对PC组更高。6、肺组织AQP5mRNA表达情况:PC组及BMSCs干预组在各时间点的AQP5mRNA表达均低于NC组,与PC组相比,BMSCs干预组在各时间点的AQP5mRNA表达均较PC组高。结论:1、经尾静脉注射的外源性BMSCs可以到达博莱霉素诱导肺纤维化小鼠的肺组织并在局部定植,且能在局部发挥抗炎、抗纤维化的干预作用;2、外源性BMSCs发挥抗炎、抗纤维化的机制可能是通过在局部分化成为肺泡上皮细胞并增加SP-C、AQP5的表达量从而达到恢复肺干细胞库、修复肺损伤的目的。
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