黄瓜簇生突变体的鉴定及其候选基因初步定位

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黄瓜是(Cucumis sativus L.;2n=2x=14)葫芦科甜瓜属植物,是世界上重要的蔬菜之一,也是我国重要的温室蔬菜作物之一。其营养器官,即根、茎、叶虽然不是最终的食用器官,但对最后整个植株的产量形成有至关重要的意义。黄瓜茎是植株的中轴部分,具有输导营养物质和水分以及在一定空间支持叶、花和果实的作用。黄瓜簇生(多分枝性)是黄瓜生长过程中的一个理想株型,对于产量的提高有着重要的意义,而相关研究报道较少。本研究实验材料来源于课题组EMS突变体库中的簇生突变体430。对黄瓜簇生突变体430进行了表型鉴定、遗传分析,并对黄瓜簇生候选基因(暂命名为Cs-clus)进行了初步定位。主要结果如下:(1)通过对黄瓜簇生突变体430整个生长时期的观察发现:与野生型相比,在株型和花器官上存在突变。簇生突变体430茎较野生型粗,茎多棱,同一节位上着生有2-4片叶,同时伴随有矮化现象,野生型株高为66.76±2.58 cm,突变体株高为56.12±2.69 cm;野生型的雌雄花瓣均为5片,子房为长圆形,而430的花瓣为10片,且子房呈椭圆形。(2)对簇生性状进行了遗传规律分析:将430突变体与野生型进行杂交,F1代表现正常的野生表型。通过F1代自花授粉得到的F2代中,有51株为430突变体表型,139株表现为野生型,分离为3:1,经卡平方(χ2)检测,F2代群体中正常植株与突变体植株的比值符合孟得尔遗传的分离比率,表明430突变体是由单隐性基因控制的质量性状。(3)利用MutMap方法混池重测序进行分析,选取F2代簇生表型30株,等量DNA进行混合,构建基因池,并与原始野生型材料649同时进行重测序,依据SNP指数以及突变位点对基因的影响进行综合分析,筛选出13个SNP,其中黄瓜第1号染色体2个SNP位于外显子区C-T的有意义突变位点,基因编号为Csa1G059210,Csa1G064750。在F2代群体中进行KASP基因分型技术检测,发现基因Csa1G059210,Csa1G064750在10个F2代中的簇生突变植株中分型不一致,由此可见基因Csa1G059210,Csa1G064750并不是Cs-clus基因。目前正在对其他候选基因进行鉴定。本实验中的黄瓜簇生突变体,具有分枝增多、植株矮化的突变表型。如能合理利用其突变表型,则能增加黄瓜植株的光合作用以及抗倒伏能力。因此,簇生品种的应用,不仅能够有效提高产量,改善果实品质,在一定程度上,还能解决市场上的供需不平衡现象,满足人类的需求。同时通过对簇生突变体430相关基因进行初步定位,为黄瓜品种的丰富以及优秀种质资源的选择提供参考和依据。
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