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目的:本研究目的在于观察核型固醇调节元件结合蛋白1c(nuclear form of sterol regulatory element-binding protein-1c,nSREBP-1c)过表达小鼠的棕色脂肪组织及皮下白色脂肪组织的血管基质部分(Stromal vascular fraction,SVF)细胞体外培养及诱导成脂的结果,并初步探讨其机制。同时观察nSREBP-1c过表达小鼠血清作用下的3T3-L1细胞诱导成脂情况及对野生型小鼠的脂代谢调节情况,寻找脂肪发育与代谢的调控机制。方法:①SVF细胞的获取与传代,从过表达nSREBP-1c的aP2-nSREBP-1c(aP2)小鼠及其同代正常基因型的野生型(wild type,WT)小鼠分离棕色脂肪(Brown adipose tissue,BAT)及皮下白色脂肪(White adipose tissue,WAT)组织,获取SVF细胞,并用SV40慢病毒转入大T抗原使细胞永生化,建立体外稳定传代的细胞②对获取的永生化SVF细胞进行成脂诱导,并通过油红0染色、western blot检测相关成脂蛋白和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测相关基因mRNA表达,观察其成脂及脂代谢情况。③制备aP2小鼠及WT小鼠血清,观察两者对正常3T3-L1细胞的诱导成脂影响,通过油红0染色、western blot及RT-PCR,观察其成脂及脂代谢情况。④制备aP2小鼠及WT小鼠血清,尾静脉注射,观察对WT小鼠的脂肪组织成脂基因的mRNA表达影响。结果:①两种小鼠BAT及WAT获取的原代SVF细胞经过3-4代的传代得到较高纯度的脂肪前体细胞、SV40慢病毒转入large T进行永生化后,细胞可多次传代,未见其传代能力的减退。②对获取的永生化SVF细胞进行诱导成脂,油红染色发现aP2小鼠相比WT小鼠,其BAT、WAT有更好的成脂效果(P<0.05),通过RT-PCR检测WAT来源的SVF成脂相关mRNA表达情况,发现aP2组SVF细胞诱导成脂后过氧化物酶体增殖物激活受体γ(Peroxisome proliferator activated receptor gamma,PPAR-γ)及 CCAAT增强子结合蛋白 α(ccaat/enhancer binding protein-α,C/EBPα)mRNA 表达高于WT组,western blot检测WAT来源SVF蛋白表达情况,发现aP2组SVF细胞诱导成脂后PPAR-γ表达高于WT组(P<0.05)。③制备aP2小鼠及WT小鼠血清,观察其对正常3T3-L1细胞的诱导成脂影响,通过油红染色观察发现3%小鼠血清浓度下,aP2小鼠血清较WT小鼠血清抑制作用明显,aP2小鼠血清处理的3T3-L1细胞在诱导成脂后PPAR-γ及C/EBPα表达量较WT小鼠血清处理组有所下调(P<0.05)。④相比WT血清组,aP2血清组的WT小鼠的eWAT组织内PPAR-γ及C/EBP α的mRNA表达下调(P<0.05)。结论:①aP2小鼠的SVF细胞中的脂肪前体细胞在离体条件下可被正常诱导为成熟的脂肪细胞,与其在体内出现脂肪萎缩的情况相反,且其诱导结果优于WT组;②aP2小鼠血清相比WT小鼠血清,对正常3T3-L1细胞的诱导成脂及正常WT小鼠的eWAT的成脂基因的表达有一定的抑制作用;③提示aP2小鼠内环境(血清)是aP2小鼠脂肪代谢障碍,脂肪细胞发育异常,出现脂肪萎缩的重要因素。