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脓毒症是严重创伤、烧伤、休克、感染和大手术后常见的严重并发症之一,其发病率和死亡率很高。心功能不全和心肌细胞损伤是脓毒症的主要表现之一,有7%的脓毒症患者出现心功能不全。血必净注射液是防治脓毒症和多器官功能障碍综合征(MODS)的临床新药,具有抗菌、抗内毒素和拮抗炎症因子的作用。本研究采用盲肠结扎穿刺术(CLP)制备大鼠脓毒症模型,观察脓毒症大鼠心肌功能和心肌力学的改变及血必净注射液对脓毒症大鼠心肌功能的作用,并探讨其机制,从而为临床防治脓毒症并发心功能不全提供参考依据。
方法
将雄性Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脓毒症模型组(CLP组)及血必净治疗组(XBJ组),每组15只。Sham组除不结扎和穿刺盲肠,余同CLP组;CLP组采用盲肠结扎并穿刺法造模,术后立即经阴茎静脉注射生理盐水4ml/kg体重;XBJ组造模后立即经阴茎静脉注射血必净注射液4ml/kg体重。12h后经右颈总动脉左心室内插管监测大鼠心肌功能变化;留取左心室心肌组织,光镜下观察心肌细胞形态学变化并进行病理积分评价,电镜下观察心肌细胞超微结构变化;同时留取血清标本,采用双抗体夹心酶联免疫法检测血清心肌肌钙蛋白(cTn)I、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和IL-10的含量。使用Stata 7.0软件包进行统计,计量资料依据分组资料分布特征以均数±标准差(x±s)或中位数与(25%百分位数,75%百分位数)表示,依据资料性质选用参数或非参数统计方法进行组间差异比较和相关分析。
结果
1 心肌功能变化与Sham组相相比,CLP组大鼠左心室收缩峰压(LVPP)、左心室压力上升最大速率(+dp/dt max)和心力环总面积(L0)均下降(P<0.01),左心室舒张末期压(LVEDP)、左心室压力下降最大速率(-dp/dt max)均升高(P<0.01),加用血必净注射液干预治疗后均有一定程度的改善(P<0.05)。
2 心肌组织形态学改变光镜下Sham组心肌组织形态正常,CLP组可见细胞变性、炎性细胞浸润,XBJ组细胞变性轻、炎性细胞浸润减轻。CLP组大鼠心肌病理积分高于Sham组(P<0.01),使用血必净注射液后病理积分减少(P<0.01)。电镜下Sham组心肌细胞超微结构正常,CLP组见大鼠心肌细胞和线粒体损伤,XBJ组可见心肌细胞和线粒体损伤减轻。
3 血清cTnI浓度变化与Sham组相比,CLP组大鼠血清cTnI浓度升高(P<0.01),加用血必净注射液干预治疗后明显下降(P<0.01)。
4 血清炎症因子水平变化与Sham组相比,CLP组大鼠血清TNF-α、IL-1 β和IL-10水平均明显增高(P<0.01),予以血必净注射液干预治疗后均有下降(P<0.01)。
5 心肌病理积分、cTnI和血清炎症因子与心肌功能的相关性经相关分析,心肌病理积分、血清cTnI、TNF-α、IL-1 β以及IL-10水平和L0均呈负相关;经检验,有统计学意义(P<0.01)。
结论
1 本实验研究表明,大鼠脓毒症状态下存在显著的心肌功能障碍和心肌损伤,血必净注射液可以减轻脓毒症状态下大鼠的心肌损伤,改善心肌功能。
2 本实验研究表明,血必净注射液能下调脓毒症大鼠血清TNF-α、IL-1 β和IL-10的水平,从而发挥心肌功能的保护作用。