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海带是一种分布较广、营养价值较高的食用藻类。海带多糖有很好的生物活性,对人类健康很有益处。文献中对海带多糖的研究大多集中在硫酸化的岩藻聚糖上,对海带多糖的系统分级,特别是对褐藻胶的分离提取、结构鉴定和活性研究报道较少。为了探讨海带多糖活性和机理,更好地应用海带及其多糖,本文对海带多糖的分离、纯化,及各级分的结构特征与生物活性进行了系统的研究。海带经过水提、醇沉后得到两种多糖,20%醇沉得到的沉淀LFA和60%醇沉得到的沉淀LFF。LFA再经过酸分级得到两种多糖,分别是PH为2.85时的沉淀LFAG和上清LFAM,LFAG和LFAM分别经Sepharose CL-6B凝胶过滤层析制备得到多糖LFAGS和LFAMS;LFF通过DEAE-Cellulose离子交换层析和Sepharose CL-6B凝胶过滤层析制备后得到多糖LFF-1S。本论文对这三种纯化后的多糖分别进行了理化性质的研究和结构分析,其结果如下:LFAGS为白色粉末,微溶于水,分子量约为42 KDa,由GulA、ManA和GalA三种单糖组成,以1, 4-β-GulAp-1, 4-β-ManAp为主链,每四个ManA连有一个GulA,无分支,主链中有微量的β-1, 4-GalAp。LFAMS为白色粉末,难溶于水,分子量约为12 KDa,由GulA、ManA和GalA三种单糖组成,以1, 4-β-GulAp-1,4 -β-ManAp的重复单位为主链,ManAp的3位有分支,连有β-1, 4-GulAp糖残基或寡糖残基,支链末端为ManA。LFF-1S为白色粉末,易溶于水,单糖组成为GulA、ManA、Man、GluA、Gal和Fuc,分子量约为14 KDa。实验结果表明海带多糖LFAGS、LFAMS和LFF-1S对淋巴细胞有明显的调节作用。无ConA和LPS诱导时,LFAMS和LFF-1S可显著地增强小鼠脾混合淋巴细胞的增殖;在ConA和LPS诱导下,三种多糖级分可以显著的刺激ConA和LPS诱导T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖,表明三种级分多糖对ConA和LPS诱导的T细胞和B细胞有明显激活作用。当浓度大于100μg/ml时,三种多糖均能极显著地(p < 0.01)增强巨噬细胞的吞噬能力;此外,三种多糖也能增强巨噬细胞产生NO的能力,并且呈现出一定的浓度依赖性;海带多糖LFAGS具有抑制结肠癌细胞生长的作用,而LFAMS和LFF-1S对结肠癌细胞的生长没有明显影响。细胞迁移实验结果表明这三种多糖对L929细胞的迁移没有影响。