【摘 要】
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背景:近年研究表明细胞分化抑制子——Id1(inhibitor of differentiation or inhibitor of DNA binding)蛋白的过度表达与肿瘤的发生、发展有关,已证实其在多种恶性肿瘤中有
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背景:近年研究表明细胞分化抑制子——Id1(inhibitor of differentiation or inhibitor of DNA binding)蛋白的过度表达与肿瘤的发生、发展有关,已证实其在多种恶性肿瘤中有过度表达。前列腺癌作为威胁男性生命的疾病,倍受人们关注。Chetcuti A等在2001年应用基因芯片技术,首次提出在人局限性前列腺癌中Id1基因有差异表达;后又有人分别通过免疫组化和原位杂交法,进一步证实Id1蛋白在动物和人前列腺癌组织中有过度表达,但其与临床病理分级、预后等相关指标的关系需要进一步研究。Id1在前列腺癌中究竟与何种蛋白相互结合而发挥作用尚不清楚。 目的:研究人前列腺癌(prostate cancer,PC)组织中Id1mRNA和蛋白的表达及其与病理分级及临床分期等指标的关系;并通过原核表达Id1,寻找并分离与Id1相互结合的下游蛋白。 方法:采用免疫荧光技术检测43例前列腺癌、12例前列腺良性增生(benign prostatic hyperplasia,BPH)和2例正常前列腺组织中Idl蛋白的表达;用SYBR Green Ⅰ嵌合荧光法进行实时荧光PCR(Real Time PCR),检测Id1mRNA在人正常前列腺(2例)、BPH(18例)和前列腺癌组织(38例)中的相对定量;并分析Id1的表达与前列腺癌的临床病理参数如Gleason分级、前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA)和临床分期之间关系;用分子生物学技术进行Id1蛋白的原核表达,并进一步用PULL-DOWN技术分离、纯化其下游结合蛋白。 结果:Id1蛋白在正常前列腺组织中无表达;BPH组织中无或弱表达(5/12);所有前列腺癌组织都有阳性表达(43/43),而且大多数以中、高度表达为主(与BPH比,P<0.01);前列腺癌中Id1的表达水平与Gleason分级成正比(r_s=0.63,P<0.01)。实时荧光PCR检测示:Id1的mRNA在前列腺癌组织中的含量明显高于BPH组织(P<0.001)。Id1mRNA表达量与前列腺癌的Gleason评分呈直线相关
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