卵透明带3（ZP3）是一种丝状卵透明带糖蛋白，是精子的受体。以ZP3为抗原可激发机体产生免疫反应，阻止精卵结合，控制物种的生育能力。然而，当前的ZP3疫苗仍面临着两个主要的问题：一是利用ZP3蛋白疫苗免疫雌性动物时，有些雌性动物除了生育能力降低外，常伴随卵巢炎发生。根据现有的研究表明：可能是在ZP3糖蛋白上至少有两个T细胞介导的抗原决定簇，诱发卵巢炎；二是在研究和实际应用中很难获得足够专一的ZP3糖蛋白作为可行的免疫原，且该蛋白疫苗较难制作。然而人们又迫切需求一种安全、高效、无遗传制约、生产工艺简单和便于使用的不育疫苗。 在本研究中，我设计了将mZP3基因克隆到原核表达载体pGEX-4T-1中表达原核蛋白；通过真核细胞的瞬时表达系统验证pcDNA3-mZP3+pcDNA3-mIL2质粒中mZP3基因的表达水平；以pcDNA3-mZP3为疫苗，pcDNA3-mIL2为佐剂免疫小鼠，半定量PCR技术检测免疫小鼠卵巢内反映ThO细胞转化成Th1或Th2细胞程度的IL-4和INF-γ的基因表达水平，探讨小鼠体内细胞免疫应答规律；以原核表达的mZP3蛋白作为标准ELISA检测的抗原，评价B细胞激活产生特异性抗体的水平。用组织病理学技术评价小鼠卵巢损伤状况和小鼠潜在的不育性及卵巢炎的病理程度，所有数据用t-检验和齐性分析。 将mZP3基因的原核表达表达的结果，经SDS-PAGE电泳分析，在76kD位置上可见到与预计的鼠透明带3（mZP3）蛋白质数值一致的特异条带，并获得mZP3蛋白，为mZP3抗体的检测提供抗原。pcDNA3-mZP3和pcDNA3-mIL2的mZP3和mIL2基因在COS-7细胞中的高效表达，为pcDNA3-mZP3作为候选免疫原提供了有力的证据。免疫实验的结果表明：在 细胞自介亲 2影响小鼠卵透明带3(mZP 3 IDNA疫苗免疫效果的研究 80pcDNA3－mZP3免疫时能有效的产生免疫反应，降低小鼠的生殖能力，但伴随了严重的卵巢炎发生。用质粒pcDM3－mILZ辅助pCDNA3－InZP3疫苗兔疫的小鼠维持了pCDNA3－InZP3免疫产生的抗体高水平，卵泡发育的异常，和降低小鼠的生殖能力；该免疫技术尤其导致了卵巢中的 IL斗基因和 IFN－Y基因较高水平表达，卵巢损伤轻微，克服了严重的卵巢炎，并且该实验结果也反映了mILZ基因的表达可能调和了T细胞介导而引起的严重的卵巢炎。同时实验结果也表明高抗体水平与卵巢自身免疫性疾病之间的关系不成正相关性而值得深入探究。