雌二醇是一种激素类物质,过量使用会导致其在动物性食品中残留富集,进而严重危害人们的身体健康。目前检测雌二醇的常用方法主要有气-质联用法和液-质联用法,但其繁琐的前处理过程并不适合雌二醇的快速检测。表面等离子共振(SPR)传感器因具有实时、快速、样品无损等优点而被广泛应用于检测领域。但在实际检测中,由于样品成分复杂以及待测物含量低等原因,SPR传感器的信号强度和灵敏度受到了很大的影响。因此本研究基于SPR传感原理,将壳聚糖和磁性纳米颗粒相结合,充分利用壳聚糖的生物相容性以及磁性纳米颗粒的信号放大作用,构建了信号放大的SPR免疫传感技术,用于对雌二醇残留的检测。主要内容分为以下几个方面:1)利用间接竞争法,并对抗原浓度、抗体浓度、再生液等条件进行优化,从而初步建立雌二醇残留检测的SPR免疫分析技术,从而与后续的信号放大的实验作对比。该方法的线性范围是15.62-500 ng/mL,检出限为11.13 ng/mL,实验方法可靠,但是此方法的芯片稳定性较差,需要在后续试验中进行改善。2)由于蛋白载体不适合长期贮存在常温下、芯片没有良好的生物相容性,本研究以壳聚糖薄膜为抗原固定化载体使其固定在SPR芯片上,这样不仅保证传感基底的生物相容性,还为后续的磁性纳米微球提供良好的物理支撑,从而建立基于壳聚糖膜的雌二醇残留检测的SPR免疫传感技术。方法的线性范围是3.91-1 000 ng/mL,检出限是3.24 ng/mL,通过实验发现芯片的稳定性显著提高。3)磁性纳米颗粒作为放大信号的材料,与SPR结合建立磁性纳米微球-SPR信号放大免疫传感技术。该方法的线性范围是1.95-2 000 ng/mL,检出限是0.81 ng/mL,与未放大信号的前两种方法和ELISA方法分别进行相比,有着更宽的检测范围和更低的检出限。本研究利用生物相容性良好的壳聚糖膜,建立了以磁性纳米颗粒为信号放大材料的高灵敏度SPR免疫传感技术,这是SPR传感技术的重要探索,在环境监测、食品安全、药物分析、等领域具有广泛的发展前景。