溶菌酶是一种专门作用于微生物细胞壁的水解酶,广泛应用于食品工业、包装工业、医学临床及生物工程中。随着各种新的生物分离技术的出现,用于溶菌酶分离纯化的方法也愈来愈多,从传统的结晶法、沉淀法、色谱法、离子交换法,到现在采用的新技术如亲和膜色谱、反胶团萃取、双水相萃取等。其中固相萃取法具有回收率高、有机溶剂消耗少、富集倍率高、操作简单、省时、省力、易于自动化等优点,是最常使用的提取蛋清溶菌酶的方法。溶菌酶是蛋清主要蛋白质中唯一一种碱性蛋白质,在水溶液中带正电荷；碳纳米管经氧化处理后,在水溶液中其表面带负电荷；基于物质之间电荷的相互作用,本文建立了多壁碳纳米管在线提取蛋清中溶菌酶的新方法。将经适当纯化处理后的碳纳米管装入自制的固相萃取柱,对蛋清中溶菌酶进行选择性吸附后,用碳酸盐缓冲溶液进行定量洗脱。本文在顺序注射系统中,对洗脱剂、洗脱剂的pH以及富集流速、洗脱流速、洗脱剂体积等实验参数进行了优化选择,并考察了洗脱剂的离子强度对洗脱结果的影响。实验结果表明,多壁碳纳米管微柱可以有效的定量萃取溶菌酶,富集倍率为12,试样处理量为10个h-1。对实际样品鸡蛋清进行提取,得到电泳纯度为100%的溶菌酶,100 mL鸡蛋清可提取溶菌酶0.40 g。若蛋清中所含蛋白质按13%计算,该方法所提取的溶菌酶占蛋清中蛋白质总量的3.6%,与标准值相符。与其它提取蛋清溶菌酶的方法相比较,本法具有试剂用量少、提取速度快等优点。此外,由于引用了顺序注射这种在非平衡状态下快速进样的分析技术,使得该法还具有在线、微量、密闭、自动等优点。