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目的:利用酵母双杂交技术了解Sedlin/Depp之间的相互作用及Sedlin与Depp相互作用的区域。构建带GFP标签的DEPP的表达载体，将其转染至COS7细胞，观察其在细胞内的定位，为以后的研究奠定基础。
方法:以pOFF-SEDL为模板，用PCR方法扩增SEDL-N序列，通过限制性内切酶酶切、回收目的片段、连接等方法将SEDL-N片段插入载体pAS2-1中，构建pAS-SEDL的缺失突变体 pAS-SEDL-N。将pACT2/pAS-SEDL、pACT2-DEPP/pAS-SEDL、pACT2/pAS-SEDL-N、pACT2-DEPP/pAS-SEDL-N四组质粒分别共转化入酵母菌Y190，再通过滤膜印迹实验测定β-半乳糖苷酶活性，呈蓝色的克隆是两种蛋白可能相互作用的阳性克隆。
以含人DEPP全长cDNA序列的质粒pACT2-DEPP为模板，用PCR方法扩增DEPP全长序列，扩增产物与T载体连接，构建克隆载体pUCm-T-DEPP。用限制性内切酶酶切重组质粒，回收目的片段DEPP，插入带GFP标签的载体pCDGFP中构建表达载体pCDGFP-DEPP。用限制性内切酶酶切图谱分析及DNA序列分析两种方法鉴定构建的质粒。将构建正确的质粒转染至COS7细胞，DAPI染色，在荧光显微镜下观察其细胞定位。
结果:营养筛选和β-半乳糖苷酶活性测试均表明四组共转化入Y190的质粒中，仅pACT2-DEPP/pAS-SEDL组克隆为阳性，其余三组均为阴性；经限制性内切酶酶切图谱分析及DNA序列测定证实pCDGFP-DEPP的构建是正确的，细胞定位实验显示Depp广泛分布于细胞内，在胞核内的表达略强。
结论:应用酵母双杂交系统验证了Sedlin与Depp之间的相互作用；羧基端27个氨基酸残基对于Sedlin与Depp的相互作用是必须的；成功构建表达载体pCDGFP-DEPP；通过细胞转染明确Depp广泛分布于细胞内，在胞核内表达略强。