研究背景：　　 结节性硬化症(tuberous sclerosis complex，TSC)是一种常染色体显性遗传性疾病，临床主要表现为癫痫、智力低下和皮脂腺腺瘤(Vogt三联征)，并有超过1/3的患者发展为药物难治性癫痫。TSC癫痫患者皮质发育病灶区及皮质结节区出现特征性的异构神经元(Malformed neurons，MNs)，如异形神经元(Dysmorphic neurons，DNs)和巨形细胞(Giant cells，GCs)，是其脑损害最典型的病理性标志。过去临床电生理研究发现这两类细胞可能做为TSC病灶癫痫发作的起搏点，而其参与癫痫发作的主要机制目前尚未阐明。传统型TRP通道(Canonical TRP，TRPC)作为一类可调节细胞内钙离子浓度的非选择性阳离子通道，其在癫痫发作中的作用倍受关注。TRPC通道在哺乳动物的中枢神经系统中有很高的表达，参与了细胞膜受体激活磷脂酶C后所介导的钙离子内流，并有研究发现在TSC致痫病灶区的细胞中存在钙离子内流而引起的神经元电活动异常。前期有研究发现，TRPC通道的部分亚型(TRPC3、TRPC6)在FCD的致痫病灶中表达显著上调，并且主要分布在与FCD癫痫发作相关的特征性神经元-“异构神经元”上。而TCS和FCD具有相似的组织病理学特征，即出现异构神经元(MNs)，包括异形神经元(DNs)和巨形细胞(GCs)。据此推测，TRPC3、TRPC6通道可能在TSC致痫病灶中表达异常，并可能与TSC导致的癫痫发作密切相关，而相关研究还少见报道。为此，本研究采用Western blot、免疫组化及免疫荧光双标首先检测TRPC3、TRPC6通道在非结节性硬化、非癫痫患者的正常皮层脑组织中的表达情况，并与之做对照，观察TRPC3、TRPC6通道在结节性硬化症癫痫患者病灶皮层中的表达变化及分布情况，旨在探讨TRPC通道在癫痫发作中的可能作用，为揭示TRPC通道与TSC致痫之间的关系提供重要的理论依据。　　 目的：　　 TRPC3、TRPC6通道在TSC癫痫患者皮层脑组织的表达与分布，探讨TRPC3、TRPC6通道参与结节性硬化导致癫痫发作的可能机制。　　 方法：　　 收集自2008年6月至2010年12月手术切除并经病理检测证实是TSC癫痫患者的皮层脑组织标本26例，与10例正常对照皮层脑组织(control cortex，CTX)作比较，采用Western blot、免疫组化及免疫荧光双标方法定性、定量检测TRPC3、TRPC6在对照皮层脑组织与TSC癫痫患者皮层病灶脑组织的表达分布情况。　　 结果：　　 1.Western blot蛋白检测结果显示：在对照皮层脑组织(CTX)中，TRPC3、TRPC6分别在相应的分子量91KDa及94KDa处有特异性蛋白条带，从蛋白水平证实正常脑组织中表达TRPC3、TRPC6；在TSC皮层结节脑组织中，TRPC3、TRPC6分别在相应的分子量91KDa及94KDa处有特异性蛋白条，与CTX相比，TSC组TRPC3、TRPC6条带与内参GAPDH条带灰度值之比显著增高，差异具有统计学意义(P<0.05)；　　 2.免疫组化结果显示：TRPC3、TRPC6在对照皮层脑组织神经元中广泛表达；TRPC3、TRPC6在TSC皮层结节脑组织中平均染色强度值较CTX明显增强(P<0.05)，TRPC3、TRPC6高度表达于TSC皮层结节脑组织中具有特征性的异构神经元(MNs)上，包括异形神经元(DNs)和巨形细胞(GCs)；　　 3.免疫荧光双标结果显示：TRPC3、TRPC6阳性的MNs与神经元标志物NeuN、NF-200均存在共表达，TRPC3、TRPC6表达阳性的胶质细胞与Vimentin共表达，但未观察到TRPC3、TRPC6表达阳性的DNs及GCs与胶质细胞标志物GFAP、Vinmentin共表达。　　 结论：　　 TRPC3、TRPC6在结节性硬化症癫痫患者致痫病灶皮层中表达上调，以及特异性的细胞分布模式，提示TRPC3、TRPC6通道可能与TSC癫痫发作密切相关。