【摘 要】
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牛至精油、白点清、指环清、孢虫净均为杀灭水产养殖生物寄生虫的常见药物,其作用的代谢过程和分子机制较为复杂,有待进一步探索。牛至精油为天然植物提取物,作用范围较广且成分较为清晰,是研究植物提取剂对寄生虫影响分子机制的良好材料。本研究以单细胞模式原生动物嗜热四膜虫作为实验对象,通过测定其细胞密度,判断牛至精油等四种药物对嗜热四膜虫的生长影响,并利用转录组测序方法,从细胞及基因层次分析牛至精油影响嗜热四
【基金项目】
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国家自然科学基金（21976208）； 武汉市应用基础前沿项目（2019020701011483）；
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牛至精油、白点清、指环清、孢虫净均为杀灭水产养殖生物寄生虫的常见药物,其作用的代谢过程和分子机制较为复杂,有待进一步探索。牛至精油为天然植物提取物,作用范围较广且成分较为清晰,是研究植物提取剂对寄生虫影响分子机制的良好材料。本研究以单细胞模式原生动物嗜热四膜虫作为实验对象,通过测定其细胞密度,判断牛至精油等四种药物对嗜热四膜虫的生长影响,并利用转录组测序方法,从细胞及基因层次分析牛至精油影响嗜热四膜虫生长的可能作用机制,本研究的主要结果如下:（1）绘制嗜热四膜虫的生长曲线,测定其在正常培养条件下达到生长平台期为48h,细胞生长密度约为130万cells/m L,并以对数生长初期（～12万cells/m L）的嗜热四膜虫细胞群体密度作为后续药物处理时的细胞初始密度。（2）将嗜热四膜虫暴露于一系列不同浓度的牛至精油、白点清、指环清、孢虫净药物溶液中,曲线结果表明牛至精油等四种药物均对嗜热四膜虫的生长有抑制作用。牛至精油、白点清、指环清、孢虫净作用下嗜热四膜虫24h EC50值分别为2.16×10-4g/m L,3.57×10-3g/m L,7.75×10-5g/m L,1.41×10-4g/m L。（3）对牛至精油作用下0 h和24 h的嗜热四膜虫的基因表达情况进行分析,根据高通量转录组测序结果,GO功能富集和KEGG通路分析发现,特异上调差异表达基因无功能富集,特异下调差异表达基因功能主要富集在RNA加工、蛋白质分解代谢、细胞定位和信号转导等过程。特异下调差异表达基因主要涉及细胞自噬及细胞周期等通路。而这些过程或通路上基因表达水平的下调可能会抑制细胞的生长。（4）根据牛至精油作用下嗜热四膜虫相关基因表达变化和通路分析,绘制了其影响嗜热四膜虫细胞生长的可能模型,为探讨不同药物影响细胞生长的分子调控机理提供线索,有助于理解和认识杀虫药物对细胞生长调控的作用。
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