姜黄素衍生物抑制结肠癌细胞增殖侵袭作用

来源 :广州医学院 广州医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hynyjhnyjn66656
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姜黄素是从天然植物姜黄中提取的一种酚类化合物,具有抗炎及抗氧化双重作用。已有研究证实姜黄素通过抑制肿瘤血管生成对多种人类肿瘤具有抑制作用。然而姜黄素水溶性差、易水解、不稳定,口服吸收后迅速被肝脏代谢,首过消除现象明显致使其生物利用度低;而姜黄素的衍生物能有效提其高生物利用度,增强抗肿瘤效能。本研究探讨姜黄素及其4种衍生物(T316、T62、T63、T6F4)对结肠癌细胞株Lovo和SW480增殖、迁移能力及诱导癌细胞凋亡能力的影响;并将姜黄素和4种衍生物的抗结肠癌作用进行了比较。  目的:  研究姜黄素(Curcumin,Cur)及其4种衍生物(T316、T62、T63、T6F4)对结肠癌细胞株Lovo和SW480的毒性作用及增殖迁移能力的影响,并初步探讨其作用机制。  方法:  (1)利用低浓度(0.125μmol/L~32μmol/L)的姜黄素及4种衍生物作用于人结肠癌细胞株Lovo和SW48048h后,通过四甲基偶氮唑盐(MTT)比色检测姜黄素对这两株肿瘤细胞生长抑制能力的影响;  (2)采用细胞划痕实验检测姜黄素及4种衍生物对人类两株结肠癌细胞24小时内迁移作用的影响;  (3)利用软琼脂克隆实验检测姜黄素及4种衍生物对人类两株结肠癌细胞克隆增殖能力的影响;  (4)PI单染流式细胞技术检测姜黄素及其4种衍生物对结肠癌细胞凋亡能力的影响;  (5)荧光素酶报告基因检测姜黄素及其4种衍生物对TNF-α诱导下结肠癌细胞内核转录因子(NF-κB)信号通路的影响。  结果:  0.125μmol/L~32μmol/L浓度范围内Cur对Lovo株和SW480株细胞的生长抑制率随药物的浓度升高而增大,呈剂量依赖关系;0.125μmol/L~10μmol/L浓度范围内T316、T62、T63、T6F4对Lovo株和SW480株细胞的生长抑制率尚呈剂量依赖关系,但10μmol/L之后增大药物的浓度,细胞生长抑制率变化不明显;姜黄素对Lovo和SW480的半数抑制浓度(IC50)分别是14.22±0.20μmol/L和10.56±0.70μmol/L,高于4种衍生物对两株细胞IC50的6~8倍(P<0.01);根据MTT试验我们选用0.5μmol/L这一药物浓度进行下面的试验。对照组两株细胞24小时迁移距离分别为160.7±18.4μm、389.9±8.9μm,Lovo细胞各实验组24小时的迁移距离在56.7±5.4μm~102.9±10.0μm之间,SW480细胞各实验组24小时的迁移距离在80.4±9.6μm~159.9±18.8μm之间,但四种衍生物组细胞迁移的距离均小于对照组细胞迁移距离的三分之一(P<0.05)。对照组两株细胞的克隆数分别为60±8个和75±5个,Lovo细胞各实验组克隆数在24±3个~55±3个之间,SW480细胞各实验组克隆数在34±4个~64±6个之间,但四种衍生物组癌细胞的克隆数均少于对照组克隆数的二分之一(P<0.05)。检测各组细胞凋亡率分别为56.67±1.88%、31.83±0.85%、26.01±0.44%、21.44±3.01%、10.05±0.54%,姜黄素及4种衍生物诱导Lovo株细胞的凋亡率均高于对照组细胞的凋亡率(6.81±0.23%)(P<0.05)。荧光素酶报告基因试验中我们发现肿瘤坏死因子(TNF-α)能明显增强细胞内NF-κB的表达活性;而浓度为0.5μmol/L的T316、T62、T63、T6F4、Cur能显著下调细胞内TNF-α诱导下的NF-κB的表达活性。  结论:  姜黄素及其衍生物能抑制结肠癌细胞的增殖迁移能力,促进结肠癌细胞的凋亡,且衍生物的作用明显强于姜黄素本身;姜黄素及其4种衍生物能下调细胞内TNF-α诱导下的NF-κB的转录活性。
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