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目的:检测人肝癌细胞株和正常人肝细胞株IL-24受体表达谱,初步探讨IL-24-Bax融合分子对肝癌细胞的凋亡诱导作用。
方法:应用细胞免疫化学方法检测人肝癌细胞株(BEL-7402、HepG2、Huh-7、PLC/PRF/5、QGY-7701、SMMC-7721)和正常人肝细胞株(L02)3个IL-24受体亚基(IL-20R1、IL-20R2、IL-22R)表达情况。应用分子克隆技术重组由IL-24cDNA和BaxαcDNA组成的融合基因IL-24-Bax,构建表达载体pcDNA3.1-IL-24和pcDNA3.1-IL-24-Bax,瞬时转染PLC/PRF/5细胞,用活细胞计数法和TUNEL法比较二者对靶细胞生长和凋亡的效应。
结果:除PLC/PRF/5细胞全部表达3个受体亚基外,其他受检细胞(包括肝细胞)均只表达IL-20R2和IL-22R。pcDNA3.1-IL-24和pcDNA3.1-IL-24-Bax瞬时转染PLC/PRF/5后,Westernblot可检测到目的蛋白表达,细胞免疫化学染色显示其定位于细胞质。与空白组和空载体组相比,IL-24及IL-24-Bax可显著抑制人肝癌细胞株生长增殖(P<0.05),并显著增加肝癌细胞的凋亡百分率(P<0.05),且后者的作用强于前者(P<0.05)。 结论:不同的肝癌细胞具有不同的IL-24受体表达谱,正常肝细胞甚至具有与肝癌细胞相同的IL-24受体表达谱。IL-24选择性诱导肝癌细胞凋亡的作用可能不通过已知的受体介导。IL-24-Bax融合分子在体外能放大对肝癌细胞的生长抑制和凋亡诱导作用。