目的:胃癌属于上消化道肿瘤疾病,在我国有着较高发病率和死亡率。许多研究表明中医药在胃癌的治疗过程中有着独特的优势,应用前景广阔。课题组前期体外实验表明中药复方养正散结方含药血清能通过miR-7调控胃癌细胞生长,抑制其增殖、诱导其凋亡。本研究在此基础上,进一步验证养正散结方冻干粉对胃癌细胞增殖及迁移的影响,探索该方发挥抑癌作用可能存在的细胞信号通路。方法:1.建立人胃癌MKN-45细胞裸鼠皮下移植瘤模型,设立模型对照组、养正散结方及阳性对照组,观察给药期间各组肿瘤的体积、重量及裸鼠的一般状况,验证养正散结方体内对移植瘤的抑制作用。2.养正散结方冻干粉体外处理人胃癌细胞株AGS及MKN-45,运用CCK-8法及平板克隆形成实验检测该复方对细胞增殖的影响。采用划痕愈合实验检测该复方对细胞迁移的影响。3.经养正散结方冻干粉体外干预后,蛋白印迹法检测胃癌细胞蛋白EGFR的表达,ERK、AKT蛋白的表达及其磷酸化,探索养正散结方对EGFR下游信号通路的影响。4.采用蛋白印迹法检测经养正散结方处理后,胃癌细胞p65、p50蛋白的表达,探索养正散结方对NF-κB信号通路的影响。结果:1.给药28天后,阳性对照组、养正散结方组裸鼠移植瘤的抑瘤率分别为59.57%、48.94%。相较于模型对照组,该两组裸鼠移植瘤的生长明显受到抑制（P<0.01）。2.将不同浓度的养正散结方作用于胃癌AGS、MKN-45细胞,给药24h、48 h、72 h后,胃癌细胞的存活率显著降低,细胞增殖明显受到抑制（P<0.05）。将含药浓度0.2、0.4、0.6、0.8、1 g·L-1的中药作用AGS细胞48 h后,对照组及各中药组的克隆形成率依次为:51.04%、49.38%、38.92%、30.92%、19.33%、5.63%;干预 MKN-45细胞48 h后,对照组及各中药组（0.4、0.8、1.2、1.6g·L-1）的克隆形成率分别为:38.83%、32.23%、17.80%、6.33%、0.70%,当含药浓度为2 g·L-1时,基本无法形成细胞集落。相较于对照组,中药组胃癌细胞的克隆形成率明显降低（P<0.05）,且随着给药浓度的增加而逐渐降低。3.胃癌细胞经养正散结方处理24 h、48 h后,细胞的迁移能力相较于对照组明显降低（P<0.05）。4.将含药浓度1、2、4g·L-1的养正散结方干预AGS细胞,2、4、8g·L-1的养正散结方干预MKN-45细胞后,胃癌细胞的EGFR蛋白表达明显降低（P<0.05）。与对照组比较,中药组MKN-45细胞的ERK蛋白表达及其磷酸化水平下调（P<0.05）。用2 g·L-1的养正散结方处理AGS细胞6h、12 h、24 h后,ERK蛋白的磷酸化水平明显下调（P<0.05）。分别用2 g·L-1的养正散结方处理AGS细胞、4 g·L-1的养正散结方处理MKN-45细胞,给药6h、12h、24 h、48h后,从24 h开始,胃癌细胞的AKT蛋白磷酸化水平均明显下调（P<0.05）。5.养正散结方处理胃癌细胞48 h后,胃癌细胞的p65蛋白的表达明显降低（P<0.05）,p50蛋白的表达差异无统计学意义。结论:养正散结方体内能显著抑制裸鼠胃癌移植瘤的生长,体外干预能降低胃癌细胞AGS、MKN-45的增殖和迁移能力,其作用机制可能与抑制胃癌细胞EGFR蛋白的表达及其下游的ERK、AKT信号通路,阻断NF-κB信号通路有关。