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I癌症是目前严重威胁人类健康的最主要疾病之一,因此探索有效治疗癌症的方法显得十分重要。第一、二代溶瘤病毒对癌症的治疗都不理想。溶瘤痘苗病毒作为第三代溶瘤病毒有着更多的优势。它具有宿主范围广、复制速度快、副作用明确、允许插入长片段外源基因和引起抗肿瘤免疫反应等特点。删除溶瘤痘苗病毒的B18R或TK非必须基因,可以增强病毒对肿瘤细胞的靶向性且不影响其复制,故溶瘤痘苗病毒是一种理想的基因治疗载体。目前已经有报道称,在溶瘤痘苗病毒TK区插入一个外源基因有很好的抗癌效果。为了增强溶瘤痘苗病毒对癌细胞的杀伤效果,我们在痘苗病毒的TK区和B18R区分别插入IL24和MnSOD基因,构建了OncoPox-IL24-MnSOD重组病毒。IL24和MnSOD基因是最近几年发现的肿瘤抑制因子,在多种癌细胞中低表达,能抑制正常细胞向癌细胞转化、诱导抗肿瘤免疫反应、抑制癌细胞生长和诱导癌细胞凋亡等效果。本文通过同源重组的方法将外源基因IL24和MnSOD依次插到痘苗病毒的TK区和B18R区,单独在TK区插入MnSOD基因,成功构建了OncoPox-IL24-MnSOD,OncoPox-MnSOD两种病毒,使外源基因在癌细胞中表达,从而达到诱导癌细胞凋亡的目的。通过MTT实验和Hoechst染色实验,我们发现OncoPox-IL24、OncoPox-MnSOD和OncoPox-IL24-MnSOD三种病毒对不同的癌细胞具有不同的杀伤效果,但OncoPox-IL24-MnSOD杀伤效果要明显优于OncoPox-IL24和OncoPox-MnSOD单个病毒。故双基因溶瘤痘苗病毒对癌症的治疗可能会成为一种新的治疗策略。II癌症干细胞,也被称作肿瘤起始细胞,具有高转移、高耐药性和高致瘤性的特征,而且对肿瘤的发生、维持和复发起着关键性的作用。据报道,溶瘤腺病毒能够靶向和杀死癌症干细胞,被认为是一种很有前景的抗癌药物。ZD55能够靶向肝癌并且表现出明显的细胞毒性效应;然而,当其靶向肝癌干细胞时是否具有同样地杀伤效力仍需进一步探讨。我们利用悬浮培养的方法富集类肝癌干细胞,此种细胞具有肝癌干细胞的特征,如自我更新和分化能力、癌症干细胞相关转录因子上调和具有抗化疗作用等。本研究结果显示,ZD55在对类肝癌干细胞的细胞毒性效应和溶瘤效果方面具有很好的效果,ZD55在体外能够非常明显的诱导细胞凋亡。因此,ZD55可能会成为靶向肝癌干细胞的一种很有前景的治疗药物,为肝癌患者获得较好的临床结果。