高效液相色谱分析测定时常出现负峰现象,经研究这种负峰与对应物质的量有一定的线性关系,可将此色谱负峰的规律用于样品的色谱分析测定。该方法是一种间接光度检测方法。这种高效液相色谱-间接光度检测法是通过向流动相中添加具有检测响应物质(本底试剂)使响应弱或无光度响应的化合物以负峰的形式被光度检测器检测的一种有效方法。负峰现象产生的原理可用计量置换理论解释,若样品分子是无紫外吸收或弱紫外吸收的分子,由于流动相含有紫外吸收较强的分子,在色谱分离过程中样品分子与固定相上吸附的紫外吸收较强的分子发生置换使其返回到流动相中,相应色谱带的紫外吸收较强的分子浓度降低,紫外检测器检测出负峰(即弱吸收峰)信号。色谱负峰测定法反映了物质在色谱分离过程中存在一定的置换作用,从实验测定上支持了计量置换理论。本文对高效液相色谱负峰测定法进行了系统的研究,内容分为五章。绪论。通过对文献资料的查阅研究,概述了高效液相色谱负峰现象和计量置换理论研究和应用的历史及现状,对本文提出的负峰测定法与计量置换的关系进行了阐述。反相高效液相色谱负峰法测定甲基脂肪酮类。研究了反相液相色谱中负峰现象及产生的原理,应用计量置换作用原理解释了样品在色谱柱中的计量置换保留行为；应用负峰法测试了甲基脂肪酮各组分的含量。反相高效液相色谱紫外检测负峰与计量置换理论关系研究。进一步研究了反相液相色谱负峰产生的原理,及其与计量置换理论的关系。色谱法对变压器油中二苄基二硫醚、二苄基硫醚、联苄的定性定量分析以及正相高效液相色谱负峰测定法研究。高效液相色谱和气质联用法对变压器油中此三种物质进行定性定量分析；用正相液相色谱负峰测定法对此三种物质进行测定,研究了正相吸附色谱中的计量置换关系。萃取分配平衡理论与色谱保留行为关系的研究。用紫外吸收光谱表征萃取中分配平衡；并将其与色谱保留行为比较,用以说明色谱的保留行为中的竞争吸附和分配平衡。