活血化瘀方干预大鼠移植性肝癌MVD和VEGF的实验研究

来源 :广西中医药大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:poppytao
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目的:通过研究活血化瘀方对大鼠Walker-256移植性肝癌的MVD计数和VEGF蛋白表达的影响,探讨活血化瘀方影响肝癌血管生成的机理。  方法:购回SD大鼠90只,清洁级,体重200±20g,饲养5天后按1∶5随机抽取15只,作为空白组;把walker-256瘤株细胞注射到余下75只大鼠肝脏,诱发大鼠肝癌模型。造模后7天随机抽取10只,制作病理标本,证实成模。在造模成功后,将剩下大鼠随机分为A、B、C、D四组,分别给药14天。A组给以重组人血管内皮抑制素(恩度)按0.75mg·kg-1·d-1剂量处理;B组活血化瘀方以人体等效剂量75mg·kg-1·d-1按10ml·kg-1·d-1处理;C组:以恩度和活血化瘀方联合处理;D组(阴性对照组);以A组的同剂量生理盐水处理。E组(空白组):只给以正常饲料喂养。每组于给药后第7天每组处死7只。每组剩余大鼠第15天处死。收集肝脏标本,HE染色,镜下观察肿瘤组织结构,采用显微镜计数法计算微血管密度(MVD)、免疫组化法对血管内皮生长因子(VEGF)蛋白的表达进行检测。  结果:  1、各组大鼠肝癌组织微血管密度(MVD)的结果:  各实验组大鼠肝癌组织微血管密度(MVD)的结果显示:7天后A组、B组、C组、D组、E组肝癌组织MVD分别为:40.25±3.36,41.70±2.23,36.39±3.33,45.08±3.83、12.32±0.49;15天后A组、B组、C组、D组、E组肝癌组织MVD分别为:38.40±4.52,34.10±2.40,30.30±3.28,44.70±4.10、11.67±0.91。在本次实验中,E组数值最低,A、B、C各组MVD的表达较D组均有下降(P<0.05)。7天后同期A、B组相比,差异无统计学意义(P>0.05);B、C两组相比,差异有统计学意义(P<0.05);A、C两组相比,C组数值较低,差异有统计学意义(P<0.05);15天后同期A、B组相比,差异有统计学意义(P<0.05);B、C两组相比,差异有统计学意义(P<0.05);A、C两组相比,C组数值较低,差异有统计学意义(P<0.05);各组前后对比,A、D组差异不明显(P>0.05);B、C组数值随时间延长而下降,差异有统计学意义(P<0.05);各组和E组相比较,差异明显,差异有统计学意义(P<0.01)。  2、各组大鼠肝癌组织VEGF表达:  VEGF表达:A、B、C、D、E组第7天:4.40±0.39、4.76±0.38、3.73±0.43、5.40±0.54、0.62±0.21;A、B、C、D、E组第15天:4.23±0.34、3.82±0.48、3.07±0.36、5.23±0.39、0.56±0.31。在本次实验中,E组数值最低;A、B、C各组VEGF的表达较D组均有下降(P<0.05)。7天后同期A、B组相比,差异无统计学意义(P>0.05);B、C两组相比,差异有统计学意义(P<0.05);A、C两组相比,C组数值较低,差异有统计学意义(P<0.05);15天后同期A、B组相比,差异有统计学意义(P<0.05);B、C两组相比,差异有统计学意义(P<0.05);A、C两组相比,C组数值较低,差异有统计学意义(P<0.05);各组前后对比,A、D组差异不明显(P>0.05);B、C组数值随时间延长而下降,差异有统计学意义(P<0.05);各组和E组相比较,差异明显,差异有统计学意义(P<0.01)。  结论:  1、活血化瘀方能抑制移植性肝癌血管的生长,其与血管生成抑制剂联合使用有增效作用。  2、活血化瘀方抑制肿瘤生长的机理可能是通过抑制肝癌组织微血管生成来实现的。
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