目的:建立亚铁嗪分光光度比色法血清铁测定的参考方法；利用建立的候选参考方法，研制冰冻人血清基质铁国家标准物质。　　 方法:按照美国临床和实验室标准协会(CLSI)的推荐方法，建立亚铁嗪分光光度比色法血清铁测定的参考方法，通过测定标准参考物质(SRM)以及进行回收实验，来验证参考方法的准确性；测定混合人血清样本，观察该方法的精密度。按照国家标准物质要求制备冰冻人血清铁候选标准物质：血清收集、准备，将处理后的血清通过添加铁单元素溶液标准物质GBW08616制备成4个不同浓度，然后分别进行过滤分装，并置于-80℃冰箱中保存，对分装的血清进行均匀性与稳定性评价并定值，评价其溯源性及不确定度并对冰冻人血清候选标准物质进行互通性研究。　　 结果:用亚铁嗪分光光度比色法血清铁测定的候选参考方法测定SRM3126a，偏倚为-0.04％～-0.74％，回收率为101.33％～101.47％。3个不同浓度的混合血清样本批内变异系数(CV)为0.14％～0.26％，批间CV为0.53％～0.74％，总CV0.55％～0.88％。基质中已知的其它成分对血清铁的测定结果无干扰。4个浓度水平的冰冻人血清铁候选标准物质均匀性良好；观察为期90天的冰冻人血清铁候选标准物质在-80℃状态下贮存的稳定性，结果发现90天内血清铁浓度水平保持稳定，将继续观察长期稳定性；同时观察冰冻人血清铁候选标准物质在室温、冷藏(2-8℃)，37℃三个不同温度条件下的短期稳定性，结果表明室温3天，冷藏30天，37℃7天内血清铁浓度水平保持稳定。冰冻人血清铁候选标准物质4个浓度水平值分别是：水平1为0.4548±0.0264μ g/g，水平2为1.0571±0.0623μg/g，水平3为1.7633±0.0420μg/g，水平4为2.3055±0.0867μg/g。冰冻人血清铁候选标准物质溯源到国际标准物质SRM937，具有良好的互通性。　　 结论:亚铁嗪分光光度比色法测定血清铁精密度高、准确度好，可将其作为测定血清铁的候选参考方法；制备的冰冻人血清铁候选标准物质均匀性、稳定性良好。定值可靠，可以申报为血清铁国家二级标准物质。