一株H5N1亚型猪流感病毒的进化分析及其反向遗传操作系统的建立

来源 :新疆农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lyfhua
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为了解首次从中国福建省分离到的一株H5N1亚型猪流感病毒A/Swine/Fujian/F1/01(H5N1)分子遗传演化和生物学特性,本研究对这株病毒进行了全基因组序列测定,对其各个基因片段进行比较并绘制进化树,最后建立了该病毒反向遗传操作系统。全基因组序列测定和遗传演化分析结果表明,我国分离的这株H5N1亚型猪流感病毒的8个基因片段均来自禽源流感病毒,该病毒的核苷酸和推导的氨基酸序列与H5N1亚型高致病性禽流感病毒A/Duck/Zhejiang/52/00(H5N1)的同源性最高,均在99.3%以上,说明二者亲缘关系最近;与97年香港感染人的流感病毒HK/483/97、HK/486/97同源性不高,与人流感病毒HK/213/03的同源性较高,关系较近;部分内部基因与04年东南亚人、猫、老虎分离株的同源性在98.8%以上。本病毒对SPF鸡呈高致病性,静脉接种致病指数为2.52,平均死亡时间为2.4d;鼻腔感染鸡后病毒迅速突破呼吸系统进入到包括脑在内的几乎所有的实质性脏器,有典型的临床症状。病毒分离结果显示肺、肝、胰腺病毒含量最高,心、脾、脑、肾、法氏囊中也可分离到高滴度的病毒,表明病毒可在鸡多个组织器官内复制并产生明显病理变化,并具有广泛的组织嗜性。研究表明该病毒在由禽类传播给猪的过程中对禽的高致病性未发生改变。本研究揭示了H5N1亚型猪流感病毒A/Swine/Fujian/F1/01(H5N1)的遗传演化关系,为我国H5N1亚型猪流感病毒的遗传演化研究提供了数据;同时应用反向遗传操作技术成功拯救出了病毒,为今后进一步研究我国H5N1亚型猪流感病毒的致病机制、病毒的结构与功能、筛选新型疫苗毒株奠定实验和理论基础。
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