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目的:在细胞水平探究Notch1信号通路对人胃癌MKN-45、MGC-803细胞GLUT1表达及功能的影响,初步探讨Notch1是否能通过GLUT1调控胃癌细胞自噬水平。方法:研究Notch1敲除对胃癌细胞GLUT1(SLC2A1)表达及葡萄糖摄取能力的影响时,将细胞分为3组:空白对照组(Blank组),不做任何处理的野生型胃癌细胞;(2)阴性对照组(NC组),阴性对照病毒sg RNA-CON250感染的胃癌细胞;(3)Notch1基因敲除组(KO组),LV-Notch1-sg RNA感染的胃癌细胞。研究GLUT1过表达对Notch1敲除所造成的细胞增殖、迁移、侵袭及自噬水平变化的影响时,将细胞分为3组:阴性对照组(NC’组),阴性对照病毒CON335感染NC组胃癌细胞;Notch1基因敲除组(KO’组),阴性对照病毒CON335感染KO组胃癌细胞;Notch1敲除联合GLUT1过表达组(KO+OE组),LV-SLC2A1 27247-2感染KO组胃癌细胞。应用WB、qRT-PCR检测各组Notch1、GLUT1表达情况,应用葡萄糖检测试剂盒测定葡萄糖摄取能力,CCK-8法检测细胞增殖能力,划痕实验检测细胞迁移能力,transwell检测细胞迁移及侵袭能力,应用WB、qRT-PCR检测自噬相关基因表达情况。结果:1、Notch1敲除后,Western blot检测发现MKN-45、MGC-803细胞KO组GLUT1蛋白相对表达量明显低于NC组,差异均有统计学意义(t=5.296、32.843,P=0.006、0.000)。qRT-PCR检测发现MKN-45、MGC-803细胞KO组SLC2A1 mRNA相对表达量明显低于NC组,差异均有统计学意义(t=22.371、8.647,P=0.000、0.001)。葡萄糖摄取能力测定结果显示MKN-45、MGC-803细胞KO组葡萄糖摄取能力明显低于NC组,差异均有统计学意义(t=10.046、4.298,P=0.001、0.013)。2、Notch1敲除的基础上同时过表达GLUT1,CCK-8法检测细胞增殖能力。MKN-45、MGC-803细胞KO’组增殖能力明显低于NC’组,差异均有统计学意义(t=9.925、19.713,P=0.001、0.000);KO+OE组明显高于KO’组,差异均有统计学意义(t=-10.175、-3.430,P=0.000、0.009)。3、划痕实验见MKN-45、MGC-803细胞KO’组划痕愈合百分比明显低于NC’组,差异均有统计学意义(t=12.739、14.120,P=0.005、0.000);KO+OE组明显高于KO’组,差异均有统计学意义(t=-15.377、-10.532,P=0.000、0.000)。4、Transwell实验发现MKN-45细胞KO’组迁移、侵袭能力明显低于NC’组,差异均有统计学意义(t=15.661、15.940,P=0.000、0.004);KO+OE组迁移、侵袭能力明显高于KO’组,差异均有统计学意义(t=-5.275、-7.560,P=0.006、0.002)。MGC-803细胞KO’组迁移、侵袭能力明显低于NC’组,差异均有统计学意义(t=48.866、61.363,P=0.000、0.000);KO+OE组迁移、侵袭能力明显高于KO’组,差异均有统计学意义(t=-4.627、-11.385,P=0.010、0.000)。5、WB结果显示自噬标志性蛋白LC3Ⅱ的相对表达量,MKN-45、MGC-803细胞KO’组明显高于NC’组,差异均有统计学意义(t=-13.302、-8.760,P=0.006、0.001);KO+OE组明显低于KO’组,差异均有统计学意义(t=4.601、4.551,P=0.010、0.010)。Beclin1蛋白相对表达量,MKN-45、MGC-803细胞KO’组明显高于NC’组,差异均有统计学意义(t=-7.329、-4.058,P=0.018、0.015);KO+OE组明显低于KO’组,差异均有统计学意义(t=3.096、3.492,P=0.036、0.025)。ATG16L1蛋白相对表达量,MKN-45、MGC-803细胞KO’组明显高于NC’组,差异均有统计学意义(t=-8.091、-20.345,P=0.015、0.002);KO+OE组明显低于KO’组,差异均有统计学意义(t=9.400、7.074,P=0.001、0.002)。qRT-PCR结果表明MKN-45、MGC-803细胞自噬相关基因ATG7的mRNA相对表达量KO’组明显高于NC’组,差异均有统计学意义(t=-13.400、-12.045,P=0.006、0.000);KO+OE组明显低于KO’组,差异均有统计学意义(t=3.632、3.575,P=0.022、0.023)。ATG12 mRNA相对表达量,MKN-45、MGC-803细胞KO’组明显高于NC’组,差异均有统计学意义(t=-14.807、-12.487,P=0.000、0.006);KO+OE组明显低于KO’组,差异均有统计学意义(t=2.966、5.920,P=0.041、0.004)。结论:Notch1敲除可以抑制胃癌MKN-45、MGC-803细胞GLUT1的表达,进而抑制细胞增殖、迁移、侵袭及葡萄糖摄取,增强细胞自噬水平。在胃癌细胞中,GLUT1参与了Notch1信号通路对自噬的调控。