左乙拉西坦(Levetiracetam)是一种新型抗癫痫药,由于其作用机制独特,起效迅速,表现出良好的抗癫痫疗效和耐受性、安全性,因而成为广谱抗癫痫药物。自上市以来,左乙拉西坦销售额逐年增加,2007年全球销售额已达到10.3亿欧元,具有广阔的市场前景。(S)-2-氨基丁酰胺是左乙拉西坦的关键手性中间体。本文通过酰胺酶立体选择性拆分外消旋2-氨基丁酰胺合成左乙拉西坦关键手性中间体(S)-2-氨基丁酰胺,建立左乙拉西坦关键手性中间体酶法合成新工艺,为左乙拉西坦的高效、绿色生产奠定基础。论文首先建立了底物2-氨基丁酰胺和产物2-氨基丁酸的薄层色谱法和高效液相色谱检测方法,包括非手性检测方法和手性检测方法,并成功实现了底物与产物各对映异构体的分离。从实验室保藏的野生菌株及构建的重组菌中,经初筛、复筛,成功获得一株能够立体选择性水解合成(S)-2-氨基丁酰胺的重组酰胺酶菌株Dt-Ami 6。考察了温度、pH、金属离子、两相体系、有机共溶剂以及不同底物浓度等各反应条件对重组酰胺酶Dt-Ami 6立体选择性水解2-氨基丁酰胺的影响,结果表明,其最佳反应条件为:40℃,1 mol/L 2-氨基丁酰胺,1.6 g DCW/L菌体浓度,去离子水为反应溶剂。在最佳条件下反应40 min,(S)-2-氨基丁酰胺的收率和光学纯度分别到达41.7%和94.0%。研究了反应液中(S)-2-氨基丁酰胺的分离提取工艺,并对提纯工艺的主要参数进行了优化。结果表明,其最佳萃取条件为:pH 9.5,40℃,不高于0.5 mol/L(S)-2-氨基丁酰胺,萃取4次。在最佳萃取条件下,得到(S)-2-氨基丁酰胺的萃取率为85.6%,纯度为93%,总收率为35.7%。再利用红外光谱(FT-IR)、液相-质谱联用(LC-MS)和核磁共振(NMR)对分离纯化得到的精制产物进行鉴定和表征,确认该产物为(S)-2-氨基丁酰胺。