【摘 要】
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EB病毒作为疱疹病毒科成员,是第一个被发现的与人类肿瘤有关的病毒.由于腺病毒具有宿主范围广泛,可感染分裂期细胞,也可感染静止或终末分化细胞;能诱发较强的细胞免疫以及应
【出 处】
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中国预防医学科学院 中国疾病预防控制中心
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EB病毒作为疱疹病毒科成员,是第一个被发现的与人类肿瘤有关的病毒.由于腺病毒具有宿主范围广泛,可感染分裂期细胞,也可感染静止或终末分化细胞;能诱发较强的细胞免疫以及应用方便等优点,我们以LMP2为靶基因,构建了EBV-LMP2的重组腺病毒疫苗作为NPC等EB病毒相关肿瘤的治疗性疫苗.为了观察方便,我们还构建含GFP的重组腺病毒.将病毒上清进行了PCR和DANblot鉴定,结果证实病毒DNA中含有目的的基因的特异性片段.RT-PCR证明了外源基因在真核细胞中得以转录,免疫酶和Westernblot的结果也显示LMP2蛋白在真核细胞得到表达.将扩增后的病毒感染HELA细胞测定病毒滴度为1.5×10<9>pfu/ml.为初步探讨其应用,将重组病毒以灌胃、肌肉注射和滴鼻的方式感染小鼠,经免疫荧光检测其特异性抗体,LDH法检测特异性CTL的杀伤作用,结果发现三种给药途径均可诱发小鼠针对LMP2的特异性体液免疫和细胞免疫,而用Ad5作为对照组的小鼠则没有引起相应的免疫反应.
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