论文部分内容阅读
目的探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/丝氨酸-苏氨酸激酶(PI3K-Akt）信号转导通路在舒芬太尼后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损（myocardialischemia-reperfusioninjury, MI/RI）中的作用。方法选择健康雄性Sprague Dawley(SD)大鼠50只，体重230-280g，2-3月龄，采用随机数字表法，将其随机分为5组（n=10）：假手术组（S组）、心肌缺血再灌注损伤组（I/R组）、舒芬太尼后处理组(PO组)、舒芬太尼后处理组+PI3K特异性抑制剂LY294002组（PO+L组）、PI3K特异性抑制剂LY294002组（L组）。I/R组，PO组，PO+L组，L组采用结扎左冠状动脉前降支（left anterior descendingcoronary artery, LAD）30min，再灌注120min的方法来建造心肌缺血再灌注的模型。I/R组在再灌注前5min时尾静脉注射生理盐水1mL，PO组在再灌注前5min时尾静脉注射1mL舒芬太尼稀释液1μg/kg，PO+L组尾静脉注射1mL舒芬太尼稀释液1μg//kg+LY2940020抑制剂0.3mg/kg，L组尾静脉注1mLLY2940020抑制剂0.3mg/kg。于再灌注120min时处死大鼠，取缺血部位心肌组织，用10%多聚甲醛液固定，常规石蜡包埋，切片。用HE染色法在光镜下观察病理学结果，采用免疫组化方法测定心肌细胞Akt及磷酸化Akt(p-Akt)的表达，计算p-Akt平均光密度值与Akt平均光密度值的比值（p-Akt/Akt）,采用TUNEL染色法检测心肌细胞凋亡，计算心肌细胞凋亡指数（apoptosis index,AI）。结果1.光镜下病理观察与S组比较, I/R组、PO组、PO+L组、L组心肌组织病理学损伤严重，其中PO组心肌组织病理学损伤较其余三组轻。2.心肌细胞Akt及p-Akt的表达与S组比较，I/R组、PO组、PO+L组、L组p-Akt/Akt的表达均升高（P﹤0.05）； PO组比I/R组、PO+L组、L组p-Akt/Akt的表达升高（P﹤0.05）；PO+L组比L组p-Akt/Akt的表达升高（P﹤0.05）；I/R组与PO+L组及L组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。3.心肌组织凋亡细胞与S组比较，I/R组、PO组、PO+L组、L组AI升高（P﹤0.05）；PO组比I/R组、PO+L组、L组AI降低（P﹤0.05）；PO+L组比L组AI降低（P﹤0.05）；I/R组与PO+L组及L组比较差异无统计学意义（P＞0.05）。结论1.舒芬太尼后处理可以明显减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤。2. PI3K-Akt信号转导通路参与了舒芬太尼后处理减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用,可能是通过增加p-Akt表达，抑制细胞凋亡，从而减轻了心肌细胞的损伤。