生殖隔离被认为在维持物种边界、保持物种完整性上至关重要,是多重隔离障碍共同积累、相互作用的结果。生殖障碍根据在生殖过程中发生的阶段分为传粉前、传粉后或合子后障碍。前人提出特化的传粉系统中,传粉前的隔离强、传粉后的障碍弱或无;而在泛化的传粉系统中,传粉前的隔离弱,可能共享传粉者引起种间传粉,须有较强传粉后隔离阻止种间杂交。然而,生殖隔离障碍可能是物种形成的副产品,种间隔离程度受物种间遗传距离决定。兰科植物中分泌花蜜的物种往往有多种传粉者,而无花蜜的兰花其传粉系统往往特化,常常演化为欺骗的传粉系统。我们以石斛属兰花为对象,探究生殖隔离的模式是否与传粉系统的属性有关。石斛属为一类附生兰,具有经济、药用、观赏价值的花卉资源;主要分布区在东南亚,时见几种石斛属兰花在同一株上开花;前人有关生殖生物学研究报道了欺骗性传粉系统,但对种间生殖隔离机制的系统研究还未见报道。我们以云南麻栗坡兰花繁育基地中的19种石斛为研究对象,进行连续三年的野外观察与人工授粉实验,探究其种间生殖隔离机制与花蜜性状,具体研究分为以下几个方面:1、为了调查石斛属物种是否分泌花蜜,在花开放前,我们随机对19种石斛进行花序套袋,花开放时测量花蜜体积与糖浓度。结果表明,10种石斛是分泌花蜜的,花蜜量相对较少为0.45-2.78μL,花蜜糖浓度为8.14%-30.75%,其他9种石斛不分泌花蜜。通过重建系统发育树,我们得出,石斛属内存在花蜜转变,可从有蜜石斛转变到无蜜石斛,从无蜜石斛再转变到有蜜石斛。2、为了量化种对间地理隔离强度,我们从全球生物多样性信息网络获取了其中15种石斛的地理分布信息,统计比较了种对间重叠分布的地点数量,计算出种对间的地理隔离强度以及其对总生殖隔离的绝对和相对贡献值。结果表明:每个种对间（共46个）地理隔离很强（0.5-1.0）,其中3/4的值≥0.8,且对总隔离的绝对和相对贡献均最大。3、为了量化种对间花期隔离强度,我们于2018年调查了其中15种石斛的开花物候,记录了每种石斛的居群花期,统计了种对间花期重叠天数,计算出种对间花期隔离强度以及其对总生殖隔离的绝对和相对贡献值。结果表明:46个种对的花期隔离值为0-0.788,且2/3的值≤0.5,对总隔离的绝对和相对贡献较小。4、为了探究物种间传粉后隔离机制,我们共进行了 46对种间杂交授粉（单向）,并量化了七个阶段的生殖隔离强度:座果率、果实大小、果实重量、结籽率、种子胚的大小、种子萌发率、F1植株高度。结果表明:46个种对中有24个在座果阶段是完全隔离的,其中大多为亲缘关系较远的物种。石斛种对在其他合子后阶段仍存在一定的隔离,而个别种对间不存在隔离。在这七个阶段中,座果隔离（-0.038-1.0）对总隔离的绝对和相对贡献均最大。5、我们量化了种对间传粉前（含地理、花期）隔离障碍与传粉后隔离障碍（含座果率等七个阶段）,结果表明:46个种对的传粉前隔离强度（0.563-1.0）对总隔离的平均绝对贡献较大（0.90069）,而46个种对的传粉后隔离强度（0-0.437）的平均绝对贡献较小（0.09336）。物种间传粉前隔离较强,但传粉后隔离阶段也不可缺少。6、我们对15种石斛重建了系统发育树,将种间遗传距离与各阶段隔离强度进行双变量相关性分析。结果表明:地理隔离强度与遗传距离呈负相关,座果与结籽两个阶段的隔离强度均与遗传距离呈正相关关系,而其他六个阶段的隔离强度与遗传距离无相关性。亲缘关系较近的物种,主要通过地理分布隔离;同域开花的远缘物种可通过座果与结籽阶段来维持生殖隔离。对比分析有蜜的8种石斛与无蜜的7种石斛的生殖隔离模式,虽然两类传粉系统特化程度不同,但生殖隔离主要为传粉前（地理隔离为主）,表明该属生殖隔离模式不受传粉系统影响。传粉后的隔离主要受种间遗传距离决定。