进展期白癜风早期诊断的实验研究

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目的:白癜风(Vitiligo)是一种最常见的皮肤色素异常性疾病之一。临床上典型的白癜风以色素脱失斑为特征,根据白斑的范围、分布以及治疗反应,分为局限型、散发型、泛发型、肢端型和节段型。根据病情发展又可分为进展期和稳定期。典型的白癜风易于临床诊断,但某些难诊断病例,需行皮肤活检,但目前一些早期不典型的白癜风,如常出现的色素减退斑的进展期白癜风的病理诊断依据尚未明确,本研究通过结合wood灯、组织苏木素-伊红染色、Masson-Fontana银染、Dopa染色、常用的黑素细胞免疫组化技术如抗MART-1、S-100单抗、电镜技术探讨进展期白癜风色素减退斑的组织结构变化,并通过与进展期白癜风色素脱失斑、无色素痣(nevus depigmentosus,ND)、正常人做对照,以期发现早期白癜风的诊断线索,探讨病理学诊断价值。   方法:本试验共分为四组:①进展期白癜风色素减退皮损15例;②进展期白癜风色素脱失皮损3例;③无色素痣3例组;④正常人8例。对照组皮肤取自我院整形外科整形手术的健康人。研究方法如下:先记录取材部位皮损wood灯下形态(分三级:瓷白色(+);模糊的瓷白色(±);灰白色(-));然后分别从进展期白癜风色素减退斑、色素脱失斑、无色素痣的躯干四肢近端皮损中央及正常对照腰腹部位皮肤取材约0.5cm×1.0cm,组织一分为三,一份固定于10%中性福尔马林用于苏木素-伊红HE染色、Masson-Fontana银染和免疫组化(MART-1、S-100、CD4、CD8);一份OCT包埋,置于1.5ml冻存管,用装液氮的保温壶运送,-20℃冰冻切片用于Dopa染色;第三份4%戊二醛固定用于电镜观察。最后统计分析相关指标,探寻wood灯、组织病理以及超微结构研究技术在不典型早期白癜风的诊断与鉴别诊断价值。   结果:⑴wood下86.67%(13/15)的进展期白癜风色素减退斑呈模糊的瓷白色;进展期白癜风色素脱失斑100%(3/3)呈瓷白色;无色素痣皮损100%(3/3)呈灰白色。⑵进展期白癜风色素减退皮损HE下100%(15/15)见表皮基底色素减少,93.33%(14/15)见真皮浅层管周淋巴细胞浸润,80.00%(12/15)见灶性界面皮炎,与无色素痣皮损相比有统计学差异(P<0.05);进展期白癜风色素脱失斑100%(3/3)见表皮基底色素缺失、真皮浅层管周淋巴细胞浸润及灶性界面皮炎;无色素痣皮损66.67%(2/3)见表皮基底色素减少,33.33%(1/3)真皮浅层血管周围可见轻微淋巴细胞浸润,未见灶性皮炎。⑶进展期白癜风色素减退皮损Masson-Fontana银染评分(1.23±0.36)明显低于无色素痣皮损(1.99±0.29)(P<0.05)、正常人(3.00±3.00)(P<0.05),高于进展期白癜风色素脱失皮损(0.00±0.00)(P<0.05),差异有统计学意义。⑷进展期白癜风色素减退斑MART-1组化计数平均每100个基底层细胞阳性细胞数均值(1.71±1.63)较DOPA染色计数均值(1.31±1.26)高,P<0.05,差异有统计学意义;但比S-100组化计数均值(3.96±1.72)低,P<0.05,差异有统计学意义。⑸进展期白癜风色素减退斑的MART-1组化示33.33%(5/15)皮损Mc完全缺乏,其组化计数均值(1.71±1.63)与无色素痣、正常人相比P均<0.05,差异有统计学意义。⑹进展期白癜风色素脱失斑MART-1组化计数均值(0.00±0.00)与无色素痣(11.06±0.51)、正常人皮肤(8.15±1.13)相比P均<0.05,差异有统计学意义。⑺正常人皮肤MART-1组化计数均值为8.15±1.13,与DOPA染色计数均值(8.19±1.10)相比无统计学差异(P>0.05),但较S-100组化计数均值(6.93±1.15)高,P<0.05,差异有统计学意义。⑻进展期白癜风色素减退组CD4、CD8平均计分、CD4/CD8与进展期白癜风色素脱失组、无色素痣组、正常人比较,P值均>0.05,差异无统计学意义;但93.33%(14/15)的进展期白癜风色素减退组CD8评分≥2分,与无色素痣组相比P<0.05,差异有统计学意义。⑼7例进展期白癜风色素减退皮损(Keratinocyte,Kc)的黑素小体均减少(100.00%),较无色素痣皮损(0.00%),有统计学差异(P<0.05);而3例无色素痣皮损Kc无明显黑素小体均减少,但都有不同程度的黑素小体的聚集(100.00%),较进展期白癜风色素减退皮损(0.00%),有统计学差异(P<0.05)。   结论:①进展期白癜风色素减退皮损在wood灯下多呈现模糊的瓷白色;光镜下常见灶性界面皮炎(HE染色)、Mc灶性缺乏乃至完全缺失(MART-1组化);电镜下常见Kc内黑素小体异常;②一般情况下,结合临床病史、wood灯下皮损特征、组织HE染色、MART-1组化及电镜可以鉴别表现为色素减退斑的进展期白癜风与无色素痣。
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