近年来,肿瘤的靶向治疗整体取得了进展,但胃癌的靶向治疗无明显突破。截止本论文成稿,美国FDA批准用于临床的肿瘤靶向治疗药物有45种。其中有26种为蛋白激酶抑制剂,说明蛋白激酶系统在肿瘤发生中具有重要作用。蛋白激酶抑制剂对血液、肾、甲状腺、肺、乳腺、胰腺以及肠等部位肿瘤均显示疗效,但对胃癌没有效果,说明胃癌不在其适应症之列,相反,蛋白激酶抑制剂在治疗胃癌过程中还显示了包括胃穿孔在内的副作用。因此,发现胃癌发生的关键分子事件,阐明其与其他肿瘤不同的发生机制,采取针对胃癌有效的治疗策略是该领域研究的重大问题。ERK是蛋白激酶超家族的重要成员,文献报道,ERK可以通过磷酸化修饰调控转录因子P65的水平。本课题组前期研究发现,P65通过启动子正调控mi R-23a~27a~24,由此建立了ERK/P65/miR-23a~27a~24信号通路。本研究首先采用Western blot和Real-time PCR方法检测了ERK/P65/miR-23a~27a~24在永生化胃粘膜上皮细胞GES-1及高低分化胃癌细胞中的表达水平。结果显示,与GE S-1相比,ERK/P65/miR-23a~27a~24在高分化胃癌细胞系MKN28中的表达水平显著增高,在低分化胃癌细胞系SGC7901、MKN45及AGS中表达水平明显降低。进一步研究发现,在低分化胃癌细胞中分别过表达ERK/P65/miR-23a~27a~24能够显著抑制低分化胃癌细胞增殖;而在高分化胃癌细胞中分别抑制ERK/P65/miR-23a~27a~24能够明显促进胃癌细胞增殖。随后我们利用组织芯片通过免疫组织化学染色分别检测了90例人胃癌组织中ERK的表达及81例人胃癌组织中P65的表达,证实了ERK和P65在低分化胃癌中低表达。同时利用原位杂交方法检测miR-23a、miR-27a及miR-24在胃癌组织中的表达情况,发现三种小分子在低分化胃癌组织中也显著下降。通过分析ERK、P65的表达与临床病理特点的关系发现,人胃癌组织中ERK和P65的表达与肿瘤大小及分化程度明显相关。单因素回归分析结果显示,胃癌中ERK和P65阳性组平均生存期明显长于阴性组。裸鼠荷瘤实验证实,ERK和P65激动剂、miR-23a~27a~24 mimics及胃泌素能够显著抑制低分化胃癌生长。以上研究结果提示,胃癌与大多数实体瘤不同,具有蛋白激酶失活的分子特征,采用已有的肿瘤靶向药物治疗胃癌有促进胃癌生长的风险,治疗中低分化胃癌需采用活化蛋白激酶的策略,临床胃癌治疗药物的选择要以其能否激活蛋白激酶为主要依据;胃泌素通过激活ERK通路发挥抑制胃癌生长的作用,是有效的抗胃癌候选药物。