论文部分内容阅读
第一章超声引导下微波消融治疗肝肿瘤临床疗效以及预后影响因素分析目的:回顾性探讨超声引导下微波消融治疗原发性肝癌的临床疗效以及相关影响因素。材料方法:2010年6月到2014年11月,433例原发性肝癌患者在上海仁济医院接受了超声引导下微波消融治疗。术后一月通过腹部影像学检查(增强CT或MRI)以及肿瘤血清标志物(AFP和CA199)评估微波消融治疗完全消融率。随访时间3~54个月,应用Kaplan-Meier模型及COX回归分析探讨术后肿瘤复发及生存预后的可能影响因素。结果:肿瘤初始完全消融率为94.9%(411/433)。22例未完全消融者接受了2次消融,总体完全消融率为98.6%(427/433)。微波消融治疗后严重并发症发生率为5.3%(23/433)。患者术后中位无瘤生存时间7个月,肿瘤数目、大小及AFP是术后无瘤生存时间的独立危险因素。患者中位总生存时间43个月,肿瘤直径>5cm及AFP>400为其独立危险因素。结论超声引导下原发性肝癌微波疗效确切,可作为首选治疗方式或外科切除的最佳补充手段。肿瘤直径,数目以及AFP是影响患者预后的主要因素。第二章热消融治疗联合GPC-3 CART治疗体外实验研究目的热消融术中温度低于肿瘤灭活温度是热消融术后肿瘤残留的重要原因。本研究初步探讨高热刺激对肝脏肿瘤细胞GPC-3蛋白表达的影响以及体外联合GPC-3CART细胞治疗的可行性。材料方法将HUH7,PLC,SKHEP1细胞在56℃温度热刺激1min后放入孵箱37℃中复温培养,后于6h,12h,24h,48h,72h后通过western-blot,Flow Cytometry及RT-PCR检测热刺激后肿瘤细胞GPC-3蛋白以及m RNA表达情况。应用慢病毒感染制作GPC-3 CAR阳性表达的人T体细胞。观察该T细胞对56°热刺激后肝肿瘤细胞系的毒性杀伤作用。结果热刺激6h后HUH7 PLC/PRF5肝癌细胞系GPC-3m RNA水平逐步上升,12h达到最高峰,之后开始下降并于24h后趋于稳定;而GPC-3蛋白表达明显降低,12-24h开始恢复,48h后表达趋于稳定。毒性结果显示阳性表达GPC-3的CAR-T细胞对56℃热刺激后6h的HUH-7,PLC/PRF5以及SKHEP1肝癌细胞系的杀伤效果明显提高。结论热刺激环境下GPC-3 CAR-T细胞更易杀伤肝癌细胞。热消融联合GPC-3 CART免疫治疗可能是提高肝细胞癌治疗效果的良好途径。