低频超声荧光复合物载体联合β防御素-3在生物膜中的诊疗效果

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目的:研究低频超声微泡(ultrasound targeted microbubble destruction,UTMD)对人β防御素-3(human beta defensins-3,HBD-3)在内植物感染生物膜中抗菌作用的影响。方法:利用小鼠动物模型,研究HBD-3联合低频超声微泡对两种葡萄球菌的治疗作用。钛片内植物和细菌共同孵育24小时,待生物膜形成后,植入小鼠椎骨两侧组织内。根据处理方式的不同,所有植入内植物的小鼠随机分为6组,每组8只。A组小鼠未做任何处理空白对照,B组采用超声治疗,C组采用低频超声微泡治疗,D组采用HBD-3治疗,E组采用HBD-3联合超声治疗,F组采用HBD-3联合低频超声微泡治疗。利用共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscopy,CLSM)和扫描电子显微镜(scanning electron microscopy,SEM)观察对比每组处理后的生物膜密度、存活细胞百分比和生物膜中细菌数量。利用实时定量聚合酶联反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)分析成膜基因和抗药基因的表达。结果:与其它组相比,在F组(HBD-3联合低频超声微泡)中,钛片表面生物膜中的生物膜密度、存活细胞百分比和两种细菌的变化计数都显著的下降,差异具有统计学意义(P<0.05)。此外,我们在实验中还发现,低频超声微泡可以抑制成膜相关基因icaAD、抗药基因Mec A的表达和刺激基因icaR的表达,从而增强HBD-3的活性。结论:低频超声微泡可以有效增强HBD-3在内植物感染生物膜中的抗菌作用,并可以减缓生物膜的成熟。目的:研究低频超声靶向治疗联合人β防御素-3(HBD-3)荧光脂质微泡复合物载体治疗关节内植物耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)感染生物膜的效果。方法:利用动物实验模型对照研究。钛内植物和MRSA共同孵育24小时,待生物膜形成后,植入小鼠椎骨两侧组织内。根据处理方法的不同,所有植入内植物的小鼠随机分为6组,每组6只。A组小鼠采用HBD-3处理,B组采用HBD-3联合脂质载体治疗,C组采用HBD-3联合微泡脂质载体治疗,D组采用HBD-3联合低频超声治疗,E组采用低频超声联合HBD-3脂质载体治疗,F组采用低频超声联合HBD-3荧光脂质微泡复合物载体治疗。采用共聚焦显微镜和扫描电子显微镜观察统计生物膜中每组处理后的细菌数量。采用实时聚合酶链反应PCR分析成膜基因和抗药基因的表达。结果:F组的残余细菌百分比显著低于其它组,差异具有统计学意义(P<0.05)。F组的成膜基因表达和抗药基因的表达显著低于其它组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:低频超声联合HBD-3荧光脂质微泡复合物载体可以有效地增强HBD-3对生物膜中耐药性金黄色葡萄球菌的杀伤作用。将有助于提高骨关节感染的早期诊断率和治愈率。
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