目的：目前我国尚无基于脂多糖（LPS）抗原的，商业化的布鲁氏菌竞争ELISA（CELISA）试剂盒，用于临床血清学诊断的CELISA多为国外试剂盒，因成本高，而不利于基层推广。为此，建立拥有自主知识产权的，基于LPS的CELISA试剂盒显得尤为重要。我们目的是，以LPS为抗原，建立快速、敏感、特异的CELISA免疫诊断试剂盒。　　方法：采用改良的热酚水法提取羊种布鲁氏菌16M SLPS抗原，并对所提取SLPS抗原活性等进行鉴定，经鉴定合格的SLPS抗原，用于单克隆抗体的制备与试剂盒包被抗原。同时，对单抗快速筛选方法进行摸索，经过交叉筛选，半固体培养法筛选，筛选能与羊种布鲁氏菌16M、牛种布鲁氏菌544、猪种布鲁氏菌S2反应，而不与大肠杆菌O157、耶尔森菌O9产生交叉反应的单抗。并基于该单抗，建立CELISA试剂盒，对所建立的CELISA试剂盒进行了初步评价，如敏感性、特异性、符合率、重复率等。　　结果：⑴经改良的热酚水法提取，得到高纯度、高抗原活性的羊种布鲁氏菌16M LPS抗原，并对其经行标准化实验，所提取的LPS可用于试剂盒的研发；⑵经过交叉筛选方案，得到了五株高特异性、高亲和力的IgG亚类单抗，并选择效果最优的一株，6-7D4进行方法建立；⑶采用甲基纤维素半固体培养筛选法对单抗进行筛选，提高了得到单抗的几率，同时又缩短了特异性单抗筛选所需的时间；⑷基于布鲁氏菌16M SLPS抗原与抗16M LPS特异性单抗6-7D4，初步建立了CELISA免疫诊断试剂盒；⑸用所建立的CELISA检测240份临床牛血清样本，敏感性达91.07％，特异性达95.65%，临床符合率达94.58%，显示了良好的诊断性能与潜力。　　结论：建立了可用于光滑型布鲁氏菌临床牛血清样本检测的CELISA诊断试剂盒，其有快速，敏感性高，特异性高的特点。