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目的:
探讨用反义脱氧寡核苷酸封闭宫颈癌Hela细胞的HSP70基因，对宫颈癌Hela细胞的增殖、凋亡及顺铂化疗敏感性的影响。
方法:
1.分别对体外培养的宫颈癌Hela细胞进行转染，实验分为正常对照组、正义寡核苷酸处理组、反义寡核苷酸处理组、随即寡核苷酸处理组。采用Western blot检测各组细胞HSP70蛋白表达的请况。
2.顺铂处理体外培养的宫颈癌Hela细胞，分为正常对照组、单纯顺铂处理组、反义寡核苷酸+顺铂处理组、正义寡核苷酸+顺铂处理组、随机寡核苷酸+顺铂处理组。采用MTT法检测经顺铂处理的各组HeLa细胞的生长抑制率;流式细胞术检测经顺铂处理的各组HeLa细胞的凋亡率。
结果:
1.正常对照组、反义寡核苷酸处理组、正义寡核苷酸处理组、随机寡核苷酸处理组HSP70蛋白灰度比值分别为(1.37±0.19)、(0.38±0.13)、(1.40±0.16)、(1.41±0.16)。转染反义脱氧寡核苷酸组的HSP70蛋白表达明显下降（P＜0.01），表明反义脱氧寡核苷酸转染能有效抑制宫颈癌Hela细胞HSP70蛋白的表达。
2.正常对照组、单纯顺铂处理组、反义寡核苷酸+顺铂处理组、正义寡核苷酸+顺铂处理组、随机寡核苷酸+顺铂处理组细胞生长抑制率分别为(100.00±6.71)％、（81.29±5.42）％、(61.79±3.18)％、(81.72±6.41)％和(80.00±7.12)％。结果表明转染反义脱氧寡核苷酸组的生长抑制率明显高于其它各组(P＜0.01)，抑制HSP70蛋白表达能增强顺铂对Hela细胞的生长抑制。
3.正常对照组、单纯顺铂处理组、反义寡核苷酸+顺铂处理组、正义寡核苷酸+顺铂处理组、随机寡核苷酸+顺铂处理组细胞凋亡率分别为(4.32±1.57)％、(14.86±2.65)％、(24.61±2.90)％、(16.63±3.01)和(16.01±2.71)％。反义脱氧寡核苷酸组与顺铂处理组相比凋亡率明显增高(P＜0.05)，与正常对照组相比P＜0.01。结果表明抑制HSP70蛋白表达能增加顺铂诱导的Hela细胞调亡。
结论:
HSP70反义脱氧寡核苷酸通过下调HeLa细胞中HSP70蛋白表达，协同顺铂抑制Hela细胞增殖及促进Hela细胞调亡，提高了Hela细胞对化疗的敏感性。HSP70可望成为宫颈癌基因治疗的一个新靶点。