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随着社会的发展,饮食结构改变、作息不规律、环境恶化等因素导致心血管疾病的发病率不断增加,心血管疾病成为危害人类健康最严重的杀手之一。同时,心血管疾病的治疗费用逐年上升,不仅给患者带来生理上的痛苦,更给其家庭造成严重的负担。EGCG作为绿茶中具有生物活性的重要成分,其在抗癌、抗氧化、心血管方面具有较好的效果。但是,EGCG的生物利用率较低,需要进一步提高。本试验通过将EGCG和伐地那非结合,提高EGCG的生物利用率,用于治疗心血管疾病。主要研究EGCG与伐地那非联合对H9C2细胞(大鼠心肌细胞)的增殖作用,修复H9C2细胞的氧化损伤,并通过分析相关因子的变化研究其作用机制,具体内容如下:(1) MTT实验实验结果表明,EGCG和伐地那非单独使用能促进H9C2细胞增殖。EGCG和伐地那非最佳浓度分别是100μmol/L和2μmol/L。EGCG组、伐地那非组及二者联合使用组处理细胞48 h后,与空白对照组相比细胞增殖率分别是18.74%、10.77%、29.17%。结果表明,伐地那非显著提高了EGCG对H9C2细胞的增殖率。(2)检测EGCG组、伐地那非组、EGCG与伐地那非联合使用组的NO浓度。在MTT实验结果的基础上,利用硝酸还原法检测各组样品中NO的含量。实验结果表明,100 μmol/L的EGCG和2 μmol/L的伐地那非联合使用48 h后,与空白对照组相比,H9C2细胞中NO的浓度显著增加。经过检测,EGCG组、伐地那非组、EGCG与伐地那非联合使用组的NO浓度分别是19.75μmol/L、20.87μmol/L、22.47μmol/L。结果表明伐地那非促进了 EGCG提高细胞内NO水平的作用。(3)利用H2O2诱导损伤的存活率为50%的H9C2细胞模型,检测细胞中的SOD、MDA、GSH-XP活力,实验结果表明,伐地那非提高了EGCG抗氧化损伤的能力,二者通过调节细胞内SOD、MDA、GSH-XP活力增强抗氧化效果。(4) EGCG、伐地那非及二者联合分别处理H2O2诱导损伤的H9C2细胞,检测细胞内Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9的活性及Bax,细胞色素C和Bcl-2的表达。结果表明,伐地那非提高了 EGCG抗H2O2诱导的细胞凋亡的作用。