胃癌是最常见的消化道恶性肿瘤，尽管发病呈现下降趋势，但预后仍然不理想。淋巴结转移足胃癌转移最主要的转移途径，也是胃癌最重要的独立预后因素。胃癌淋巴结转移过程可能涉及多种蛋白，这些胃癌淋巴结转移相关蛋白的揭示对胃癌靶向治疗和预后的提高至关重要。　　 目的：利用比较蛋白质组学的方法筛选和鉴定不同淋巴结转移能力胃癌组织差异表达的蛋白，对部分差异蛋白进行表达验证和临床意义分析，明确这些蛋白与胃癌淋巴结转移的关系及其临床应用价值。　　 方法：收集淋巴结转移能力极强（小胃癌伴淋巴结转移）和淋巴结转移能力极弱（大胃癌无淋巴结转移）的新鲜胃癌组织各12例进行比较。应用双向凝胶电泳技术建立伴淋巴结转移胃癌组织和无淋巴结转移胃癌组织总蛋白质的双向凝胶电泳图谱；DPQuest软件对双向电泳图谱进行比较，寻找差异蛋白质点：采用MALDI-TOF-TOF/MS对差异表达的蛋白质进行分析，数据库检索鉴定蛋白质。收集128例胃癌存档石蜡标本，应用免疫组化技术检测14-3-3β和profilin-1表达水平与胃癌淋巴结转移的关系。利用Western blot技术检测14-3-3β和profilin-1与胃癌淋巴结转移的关系。运用logistic回归模型分析14-3-3β和profilin-1与胃癌淋巴结转移的关系，利用生存分析和Cox比例风险回归模型分析14-3-3β和profilin-1与胃癌患者预后的关系。　　 结果：有无淋巴结转移的胃癌组织相比，共筛选出31个差异表达的蛋白质点，其中23个蛋白质点在伴淋巴结转移的胃癌组织中高表达，8个蛋白质点在无淋巴结转移的胃癌组织中高表达。在胃癌组织中，14-3-3β和profilin-1主要在细胞浆中表达，仅有少数细胞存在细胞核或细胞膜的表达；14-3-3β的表达量与胃痛淋巴结转移呈正相关，profilin-1表达量与胃痛淋巴结转移呈负相关。在同一浸润深度（T2或T3），14-3-3β在伴淋巴结转移的胃癌组织中表达高于无淋巴结转移的胃癌组织，profilin-1在无淋巴结转移的胃癌组织中表达高于伴淋巴结转移的胃癌组织。logistic同归分析表明，浆膜浸润，14-3-3β高表达和Profilin-1低表达是胃癌淋巴结转移的独立危险因素。14-3-3β高表达和低表达胃癌患者的5年生存率分别是30.5％和46.5％，profilin-1高表达和低表达胃癌忠者的5年生存率分别是43.8％和32.3％。Cox比例风险回归模型分析显示，浆膜浸润、淋巴结转移以及14-3-3β高表达是胃癌忠者预后的独立危险因素。　　 结论：比较蛋白质组学是筛选胃癌淋巴结转移相关蛋白的有效方法。14-3-3β和profilin-1与胃癌淋巴结转移有关。14-3-313和profilin-l是胃癌淋巴结转移的预测因素。14-3-3β高表达是胃癌患者预后的独立危险因素。