糖肾康对糖尿病肾病SD大鼠肾组织TGF-β1、VEGF表达的影响

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目的:糖肾康对糖尿病肾病(Sprague-Dawley,SD)大鼠肾组织中的转化生长因子(transforming growth factor beta one,TGF-β1)、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表达的影响及其对肾脏的保护作用。方法:1.建立糖尿病肾病(diabetes nephropathy,DN)大鼠模型:选择健康雄性SD大鼠,采用高糖高脂饮食+单侧肾切除术+链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)造模。成模标准:非空腹血糖≥16.7mmol/L,24h尿蛋白定量>30mg。2.分组:将SD大鼠随机分为模型对照组(模型组)、培哚普利组(西药组)、糖肾康低剂量组(低剂量组),糖肾康高剂量组(高剂量组),并以正常SD大鼠为空白对照组(对照组)。3.给药方法:造模成功后开始给药,每日1次,每次1ml/100g,高剂量组浓度为(16g/kg/d)、低剂量组浓度为(8g/kg/d))、西药组以(15mg/kg/d)灌胃,对照组及模型组给予等量的生理盐水灌胃,给药干预8周。4.疗效评价方法:给药干预结束后测大鼠的体重、24h尿蛋白定量、空腹血糖;麻醉后采取腹主动脉血检测尿素氮(BUN)、血清肌酐(Scr)、甘油三酯、胆固醇,取肾,称重并进行肾组织的病理学检测。5.组织进行常规切片并行苏木紫伊红(HE)染色,光镜下观察肾组织的变化;采用免疫组化法检测DN大鼠肾组织中TGF-β1、VEGF蛋白的表达,应用SPSS17.0统计软件对实验数据进行处理,P<0.05为有统计学意义,P<0.01为有显著统计学意义。结果1.血糖方面:给药干预后模型组及各治疗组大鼠血糖均出现明显的升高(P<0.01),其中低剂量组比高剂量组血糖有所降低(P<0.05);24h尿蛋白方面:药物干预前;模型组、高、低剂量组及西药组尿蛋白均显著升高(P<0.01),但各组间无差别(P>0.05)。药物干预后;与模型组比较,各治疗组及对照组24h尿蛋白均显著升高(P<0.01),高、低剂量组较西药组24h尿蛋白明显降低(P<0.01),但高、低剂量组之间比较无差异(P>0.05);血肌酐方面:模型组、高、低剂量组及西药组与对照组相比血肌酐均升高(P<0.05),与模型组比较高、低剂量组、西药组血肌酐均显著降低(P<0.01);尿素氮方面:模型组、高、低剂量组及西药组尿素氮均显著升高(P<0.01),与模型组比较,高、低剂量组及西药组尿素氮均降低(P<0.05)。2.病理变化:光镜下看到对照组大鼠结构清晰的肾小球,形态规则。模型组大鼠肾小球系膜基质中重度增生,呈弥漫性改变,球囊部分粘连,肾小管上皮细胞呈空泡变性,间质可见炎症细胞浸润及纤维化。各治疗组肾小球病变均较模型组减轻,低剂量组及西药组效果明显。3.对照组大鼠肾小球和肾小管中有少量表达的TGF-β1及VEGF;模型组大鼠TGF-β1及VEGF的表达较对照组上调,主要在肾小球系膜区,但是肾间质和肾小管上皮细胞也有基础表达。治疗组大鼠较模型组TGF-β1及VEGF的表达明显下降,尤以低剂量组降低更明显,但仍高于对照组。结论:(1)糖肾康能够降低实验大鼠的血糖、24小时蛋白尿、血肌酐及尿素氮,减轻肾组织的病理改变,达到了治疗DN的效果。(2)糖肾康能够通过抑制TGF-β1与VEGF蛋白的表达,使肾脏受到保护,进而延缓DN的进展。
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