LETM1蛋白在结肠癌中表达及临床意义的相关性研究

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目的:  ⑴观察LETM1蛋白在结肠癌细胞株及结肠癌组织中表达情况;  ⑵探讨LETM1蛋白与PI3K-Akt信号传导通路之间相关性;  ⑶分析LETM1蛋白表达水平、Akt的Ser473及Thr308位点磷酸化水平与结肠癌病人术后无疾病生存时间的相关性;  ⑷探讨LETM1是否能够成为有价值的新的肿瘤分子标记物,为结直肠癌的临床诊断、治疗以及预后的评估提供有意义生物学指标。  方法:在SW-480结肠癌细胞株通过蛋白印迹实验观察LETM1过表达时,PTEN、Akt及GSK3β的磷酸化水平;收集2006年至2010年之间73例接受结肠癌患者术后标本,通过免疫组织化学方法检测LETM1蛋白表达情况,Akt的Thr308及Ser473位点磷酸化水平及GSK3β磷酸化情况;利用X2检验统计学方法评估了LETM1蛋白和Thr-308、Ser473、GSK3β磷酸化之间的相关性,利用Kaplan-Meier法观察结肠癌病人无疾病生存时间。  结果:  ⑴在结肠癌细胞株SW480细胞中过表达LETM1时,可抑制PETN的磷酸水平、增加Akt的Ser473和Thr308两个磷酸化位点及GSK3β的磷酸化水平。  ⑵通过免疫组化检测LETM1蛋白在结肠癌中低表达率45.2%,高表达率54.8%。  ⑶LETM1蛋白的表达分别与浸润程度、分化程度及淋巴结转移具有统计学差异(P<0.05),并呈正相关,与年龄、性别、肿瘤大小未见统计学意义(P>0.05)。  ⑷Ser473磷酸化水平与浸润程度及分化程度具有统计学意义(P<0.05)呈正相关,而与年龄、性别、肿瘤大小、淋巴结转移无统计学意义(P>0.05)。  ⑸Thr308磷酸化水平与淋巴结转移具有统计学差异(P<0.05),并呈正相关,但与年龄、性别、肿瘤大小、浸润程度、分化程度无统计学意义(P>0.05)。  ⑹GSK3β磷酸化水平与浸润程度具有统计学意义(P<0.05)呈正相关,但与年龄、性别、肿瘤大小、淋巴结转移、分化程度无统计学意义(P>0.05)。  ⑺LETM1蛋白表达分别与Ser473及Thr308磷酸化水平具有统计学意义(P<0.05)呈正相关,Ser473和Thr308磷酸化水平与GSK3β磷酸化具有统计学差异(P<0.05)呈正相关。  ⑻LETM1高表达病人无疾病生存率显著低于LETM1低表达病人(P<0.05),LETM1蛋白高表达病人4年无疾病生存率63.2%,LETM1蛋白低表达病人4年无疾病生存率74.3%;Ser473磷酸化阳性病人无疾病生存期显著低于Ser47磷酸化阴性病人(P<0.05)。Ser473磷酸化阳性病人4年无疾病生存率56.8%,Ser473磷酸化阴性病人4年无疾病生存率80.6%;Thr308磷酸化阳性病人与磷酸化阴性病人无疾病生存期未见明显统计学差异(P>0.05),Thr308磷酸化阳性病人4年无疾病生存率62.9%,Thr308磷酸化阴性病人4年间无疾病生存率73.7%。  结论:  ⑴在SW480结肠癌细胞株中LETM1蛋白过表达时抑制PETN的活性,从而增加 Akt的磷酸化。  ⑵LETM1在结肠癌中高表达与淋巴结转移、浸润程度、分化程度呈正相关。  ⑶同样,在结肠癌组织中LETM1蛋白的高表达也可激活PI3K-Akt信号传导通路。  ⑷LETM1蛋白的表达和Akt的Ser473位点的磷酸化水平与结肠癌病人的无疾病生存时间具有相关性。  ⑸LETM1蛋白可作为判断结肠癌病人预后的指标提供了一定的依据。
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