基于纳米薄膜构建的电化学免疫传感器检测甲胎蛋白(AFP)的新方法研究

来源 :福建医科大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:kaji2009
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
肿瘤已经成为危害人类健康的高危疾病,甲胎蛋白(AFP)是国际公认的常用的肿瘤标志物,已被广泛用于肝癌、生殖系统肿瘤和胚胎性肿瘤等疾病的辅助诊断。电化学免疫传感器基于免疫分析技术,克服了传统分析技术(如酶联免疫分析法等)灵敏度不高等局限性,具备灵敏度高、选择性好、价格低廉、操作方便等优点,在临床和生物领域具有广阔的应用前景,已经成为了国内外研究的热点之一。本研究提出将电化学免疫传感器技术应用于AFP的检测,而生物活性物质在电极表面的有效固定是该检测新技术的关键。本文运用了两种不同的方法制备纳米薄膜修饰电极固定抗体,构建新型的电化学免疫传感器,用于AFP的检测,获得了较满意的实验结果。首先,本文利用电聚合将聚钙羧酸修饰于电极表面,聚钙羧酸表面的活性基团(羧基)通过碳化二亚胺试剂(EDC+NHS)将AFP单克隆抗体(Ab1)固定于电极表面,根据抗体-抗原反应,构建检测AFP的夹心型电化学免疫传感器。利用扫描电镜(SEM)、电化学交流阻抗(EIS)和循环伏安法(CV)等对电极制备过程进行表征,并对实验条件进行了优化。实验结果表明,该方法具有较高的灵敏度、较好的稳定性和重现性。在最佳实验条件下,测定AFP的检测范围为0.5~200ng·mL-1,实验检测限为0.5ng·mL-1,相对标准偏差(RSD)为2.6%。此外,本文采用滴涂法将壳聚糖-碳纳米管(CS-CNT)纳米复合材料修饰在玻碳电极表面,在戊二醛的桥联作用下,固定抗体,根据抗原-抗体反应,构建检测AFP夹心型电化学免疫传感器。通过循环伏安法对电极制备过程进行表征,并优化实验条件。实验结果表明,该法制备的电化学免疫传感器具有灵敏度高,选择性好和稳定性高的特点。在最佳优化条件下,实验检测限为0.05ng·mL-1,其响应信号与AFP抗原浓度在0.05~20ng·mL-1和20~200ng·mL-1范围内呈良好的线性关系,其相对标准偏差(RSD)为9.6%。最后,本研究应用以上两种不同修饰方法制备的电化学免疫传感器,对血清样品的AFP进行检测,并与临床酶联免疫法(ELISA)结果进行比较,其相对误差均小于10%,说明本文建立的新方法可初步应用于临床实际样品的检测。
其他文献
根据技术统计,我国新能源纯电动汽车在生产与使用环节所排放的温室气体,均超 过普通内燃机车辆的排放量.国内尚未对新能源汽车温室气体排放进行规制,导致了市场竞 争恶化、新
研究目的:探讨各类颈部囊性病变的CT表现,评估多排螺旋CT对颈部囊性病变的诊断价值,在颈部囊性病变的诊断中作出具有倾向性的进一步诊断,以提高诊断准确率。方法:收集我院2012年9
结肠癌是西欧、北美等发达国家最常见的恶性肿瘤,也是我国九大常见恶性肿瘤之一。在过去30多年的时间里,包括我国在内的多数国家或地区结肠癌发病率呈上升趋势。以5-氟尿嘧啶
以某商用车为研究对象,进行了发动机动力总成隔声罩方案设计,利用Actran软件作为仿真平台,分别建立了车外噪声原车仿真模型和各设计方案的隔声降噪仿真模型,实现了不同结构、吸声
本论文包括两个部分:(一)siRNA对鼻咽癌细胞CNE1中S100A8、S100A9基因表达的影响及有效片段的筛选;(二)S100A8 siRNA与S100A9siRNA对鼻咽癌细胞CNE1迁移功能的影响。第一部分:si
癌症被称为人类第一杀手。癌症的发生发展过程涉及多种分子功能和生物学过程,研究与这些分子功能和生物学过程相关的基因表达模式及其相互作用关系,在肿瘤发生途径以及抗肿瘤
以某型特种车辆散热系统为研究对象,分析高原环境车辆散热系统性能影响因素。在理论分析的基础上提出相应的系统改进方案,建立GT一维仿真模型,应用试验设计方法(DOE, design
畅销书《数字化生存》至少道出了一个真理:当代社会中,从事与信息相关的事业,如果不及时进化到数字化时代,就会失去生存的权利。中新社近年来的变革,正是这种论断的有力佐证
当2003年同产手机市场份额达到60%,业界人士无不认为国产手机将成为继电视机、计算机之后又一民族产业支柱,不成想五年不到时间,当年的TCL、南方高科、康佳、东信等知名品牌不是