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肿瘤已经成为危害人类健康的高危疾病,甲胎蛋白(AFP)是国际公认的常用的肿瘤标志物,已被广泛用于肝癌、生殖系统肿瘤和胚胎性肿瘤等疾病的辅助诊断。电化学免疫传感器基于免疫分析技术,克服了传统分析技术(如酶联免疫分析法等)灵敏度不高等局限性,具备灵敏度高、选择性好、价格低廉、操作方便等优点,在临床和生物领域具有广阔的应用前景,已经成为了国内外研究的热点之一。本研究提出将电化学免疫传感器技术应用于AFP的检测,而生物活性物质在电极表面的有效固定是该检测新技术的关键。本文运用了两种不同的方法制备纳米薄膜修饰电极固定抗体,构建新型的电化学免疫传感器,用于AFP的检测,获得了较满意的实验结果。首先,本文利用电聚合将聚钙羧酸修饰于电极表面,聚钙羧酸表面的活性基团(羧基)通过碳化二亚胺试剂(EDC+NHS)将AFP单克隆抗体(Ab1)固定于电极表面,根据抗体-抗原反应,构建检测AFP的夹心型电化学免疫传感器。利用扫描电镜(SEM)、电化学交流阻抗(EIS)和循环伏安法(CV)等对电极制备过程进行表征,并对实验条件进行了优化。实验结果表明,该方法具有较高的灵敏度、较好的稳定性和重现性。在最佳实验条件下,测定AFP的检测范围为0.5~200ng·mL-1,实验检测限为0.5ng·mL-1,相对标准偏差(RSD)为2.6%。此外,本文采用滴涂法将壳聚糖-碳纳米管(CS-CNT)纳米复合材料修饰在玻碳电极表面,在戊二醛的桥联作用下,固定抗体,根据抗原-抗体反应,构建检测AFP夹心型电化学免疫传感器。通过循环伏安法对电极制备过程进行表征,并优化实验条件。实验结果表明,该法制备的电化学免疫传感器具有灵敏度高,选择性好和稳定性高的特点。在最佳优化条件下,实验检测限为0.05ng·mL-1,其响应信号与AFP抗原浓度在0.05~20ng·mL-1和20~200ng·mL-1范围内呈良好的线性关系,其相对标准偏差(RSD)为9.6%。最后,本研究应用以上两种不同修饰方法制备的电化学免疫传感器,对血清样品的AFP进行检测,并与临床酶联免疫法(ELISA)结果进行比较,其相对误差均小于10%,说明本文建立的新方法可初步应用于临床实际样品的检测。