富血小板血浆在兔下肢腔隙性骨缺损修复中的实验研究

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目的骨缺损的修复一直是骨科研究领域中的重要课题,随着骨组织工程技术研究的深入,利用生长因子来促进、增强骨的爬行替代和新骨形成逐渐成为目前的研究热点。国内外有大量文献报导富血小板血浆(platelet-rich plasma PRP)有明显的骨诱导能力,能促进骨组织的修复[1];但也有一些学者认为,富血小板血浆在动物实验、临床应用中无促进骨组织再生的作用或骨缺损修复的效果不明显,其主要原因可能在于各研究人员所使用的富血小板血浆制备标准不统一,从而影响了研究结果[2,3]。本实验利用新法获取的富血小板血浆复合可注射型硫酸钙人工骨组成具有生物活性的新型骨移植材料,来修复兔下肢腔隙性骨缺损,通过各项检测指标来评价其修复骨缺损的能力,并初步探讨本实验中富血小板血浆促进骨缺损修复的机制,为后续富血小板血浆的标准化制备提供相应的理论依据。方法1、先制备富血小板血浆(PRP),将PRP与人工骨按2:1比例混合成PRP凝胶。2、后选取健康新西兰大白兔40只,在动物一侧胫骨制作骨缺损模型后随机分为2组,实验组:术中在骨缺损处填塞PRP凝胶;对照组:术中在骨缺损处仅填塞人工骨。3、分别于术后第3、5、7、9周处死动物,通过大体、X线平片、病理组织切片及免疫组化观察兔骨缺损修复情况,并参照Lane氏的放射学评分标准对每组动物的骨修复情况进行评分并记录其骨缺损区的阻射密度值;用图像分析软件(Image-Pro Plus)计算其免疫组化切片的染色阳性所占的面积比例。最后用统计软件进行统计学分析。结果1、术后所有动物切口愈合良好;2、术后3、5、7周X线平片的放射学评分与阻射密度值结果显示实验组与对照组比较差异有统计学意义(P <0.05);3、大体观察与HE染色观察均显示实验组骨缺损愈合情况优于对照组;4、免疫组化观察显示术后3、5周实验组免疫染色阳性所占的面积比例高于对照组。结论1、富血小板血浆(PRP)能够促进骨缺损的修复与愈合。2、血管内皮细胞生长因子(VEGF)是早期刺激骨组织再生的重要因子。
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