衰老是人类健康领域的重大科学问题之一,由其引起的机体组织器官衰老问题也给整个生命科学和医学领域带来了严峻的挑战。研究表明,端粒对于细胞复制性衰老、整体性衰老以及由其引起的衰老相关疾病等生理病理过程起着重要的作用,端粒长度更被作为一种与生物衰老相关的标志物。端粒酶是细胞中负责延长端粒的一种核糖核蛋白复合体,其活性与人端粒酶逆转录酶(hTERT)表达密切相关,外源性表达hTERT可以提高细胞端粒酶活性,赋予其抗衰老或永生化能力。因此,hTERT表达促进剂有望成为抗衰老的新策略。本论文利用荧光素酶报告系统,构建促进hTERT表达化合物的筛选系统,对来自天津科技大学药物合成实验室的156种小分子化合物进行筛选,获得一种促进hTERT表达的化合物HKL2-3-35。分别用终浓度为4 μM和8 的化合物HKL2-3-35处理宫颈癌HeLa细胞,结果发现HKL2-3-35能够促进端粒的延长,促进细胞增殖和迁移,研究表明HKL2-3-35能够加快细胞由G1至S期的转换。同时,用终浓度为0.25μM和0.5 的化合物HKL2-3-35处理人胚胎成纤维细胞,发现化合物HKL2-3-35具有明显的抗衰老作用。另外,本论文对生活中接触到的系列环境因子化合物进行筛选,发现乙酸、咖啡因和乙酸乙酯能够促进hTERT的表达,与化合物HKL2-3-35促进效果相似,但具有更高的特异性。进一步研究发现,HeLa细胞经乙酸处理后,p21及p53 mRNA水平分别下调58.6%和31.4%;咖啡因处理后,p21及p53 mRNA水平分别下调11.6%和31.3%,表明hTERT表达促进剂可以加快细胞周期,增强细胞活力,减缓细胞衰老。综上所述,本论文筛选出化合物HKL2-3-3、乙酸、咖啡因和乙酸乙酯四种hTERT表达促进剂,为端粒酶的抗衰老机制研究提供更多的理论支持,也为开发治疗衰老相关疾病的药物提供新的策略。