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自1928年英国细菌学家Fleming发现青霉素后,抗菌药物就越来越广泛应用于临床。近年随着医疗水平的不断提高和抗生素的广泛使用,感染类型发生了改变、病原菌的种类也发生变迁。革兰阴性杆菌取代了原来的以革兰阳性球菌为主的病原,并常引起院内感染。排名前四位的革兰阴性细菌常是大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、不动杆菌属。它们通过各种不同的机制对多种抗菌药物产生耐药,造成治疗失败,因而能长期在医院内存留,感染住院患者。为有效控制医院感染须追踪感染源,对病原菌同源性分析即菌株分型尤为重要。
目的：通过IRS-PCR技术分析鲍曼不动杆菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌的DNA物质异质性,并与RAPD比较,探讨该技术在细菌分型中的应用价值,为医院感染的传染源调查奠定基础。
方法：对哈尔滨儿童医院和上海仁济医院2005年9月至2006年3月连续收集的98株菌株,进行11种抗生素的药物敏感性实验后,根据平均链锁聚类方法进行表型分型,并采用IRS-PCR和RAPD方法进行基因分型,采用NTSYS-pc软件归纳菌株之间的相关性和同源性。
结果：于哈尔滨地区和上海地区收集的98株菌株,以ICU病房标本分离率最高(46.9％);对临床常用11种抗生素中亚胺培南的敏感率是100％,对青霉素类、头孢菌素类抗生素耐药性最强；根据IRS-PCR指纹谱分析鲍曼不动杆菌DNA异质性,比对大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌分析研究效果好,将上海鲍曼不动杆菌分为13个型别、哈尔滨株有19个型,未发现两地菌株的DNA有明显地域区别。利用NTSYS-pc软件分析鲍曼不动杆菌IRS-PCR电泳图构建系统发生树,与依据Tenover标准得到的结果不完全一致。
结论：本研究收集的四种临床感染常见革兰阴性杆菌,主要分布于ICU病房,且对亚胺培南抗生素最敏感,对头孢菌素类抗生素耐药率较高；IRS-PCR技术可用于分析鲍曼不动杆菌DNA异质性,上海和哈尔滨两地鲍曼不动杆菌的DNA未发现有明显地域差异。