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奶粉中酪蛋白磷酸肽的含量对含有酪蛋白磷酸肽的奶粉有着重要影响。酪蛋白磷酸肽可促进钙、铁离子的吸收,提高机体免疫力、防止龋齿、改善动物繁殖性能、促进益生菌生长等作用。本研究选用HPLC法测定奶粉中的酪蛋白磷酸肽来改善检测方法。本研究建立了高效液相色谱(HPLC)法对奶粉中的酪蛋白磷酸肽进行检测。选用Waters e2695高效液相色谱仪配带Waters 2489紫外检测器,以及Agilent Eclipse AAAC18色谱柱进行分离,含5‰三氟乙酸的乙腈/水体系作为流动相进行梯度洗脱,流速为1.00 mL/min,柱温30℃色谱条件。通过绘制酪蛋白磷酸肽的标准曲线,得到酪蛋白磷酸肽线性范围是250~1250μg/mL。相关系数R2为0.9992~0.9998之间。本研究的最低检出限和最低定量限分别为0.50mg/100g和2.00mg/100g。本研究通过水溶液对奶粉中的酪蛋白磷酸肽进行提取,调节pH值,用三级水进行定容,过0.45μm水膜进行过滤上机,向样品中加入标准品验证方法的回收率。结果证明奶粉样品的平均回收率的范围为99.2%~104%之间,平均加标回收率为100.9%,相对标准偏差RSD值的范围为2.5%~5.0%之间。将处理后的样品进行冷藏保存,第三天和第六天后进行检测,发现峰面积、保留时间以及响应值没有明显变化,说明采用高效液相色谱仪检测奶粉中酪蛋白磷酸肽的方法稳定性好、准确度高、回收率好。本研究首先通过对酪蛋白磷酸肽在婴幼儿配方粉中干混生产工艺中含量变化进行分析,后进行实际检测验证,其含量没有明显变化,保持在223.0447±2.00mg/100g,并绘制酪蛋白磷酸肽含量的质量控制图。本研究通过对嗜热链球菌、鼠李糖乳杆菌和动物双歧杆菌在含有酪蛋白磷酸肽的基础培养基和肉蛋白胨的基础培养基中活菌数进行比较,三种益生菌在含酪蛋白磷酸肽的培养基中活菌数明显多于含肉蛋白胨的培养基,其中在稳定期,嗜热链球菌活菌数分别是1.64±0.028×109和1.02±0.025×109cfu/ml;鼠李糖乳杆菌活菌数分别是2.40±0.025×109和1.79±0.011×109cfu/ml;动物双歧杆菌活菌数分别是1.44±0.020×109和0.84±0.031×109cfu/ml。三种益生菌在含酪蛋白磷酸肽的培养基中平均直径为2.0279mm,在含肉蛋白胨的培养基中平均直径为1.6808mm。