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本研究以小麦麸皮为原料,采用混菌发酵制备阿魏酰低聚糖(Feruloyl oligosaccharides,FOs),并对初步分离纯化的FOs的体外抗氧化活性进行分析。本论文主要包括以下三个部分:1小麦麸皮FOs的混菌发酵制备工艺1.1发酵菌种的筛选本试验以小麦麸皮为基础培养基,以双波长法测定FOs产量,针对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、地衣芽孢杆菌 D3(Bacillus licheiformis D3)、植物乳杆菌P8(Lactobacillus plantarum P8)、酿酒酵母(Sacchoromycescerevisiae)四种发酵菌种,采取单菌发酵、双菌发酵、三菌发酵及四菌发酵筛选菌种组合。结果发现,B.subtilis、B.licheniformis D3与S.cerevisiae以1:1:1的比例组成的发酵菌种,发酵获得的FOs产量最高,为655.9 nmol/g,较未发酵小麦麸皮中FOs含量(207.5 nmol/g)提高了 316%。1.2增效剂的筛选在前期试验的基础上,以小麦麸皮为基础培养基,以双波长法测定FOs产量,B.subtilis、B.licheniformis D3与cerevisiae以1:1:1的比例组成混合发酵菌种,针对葡萄糖、尿素、牛肉膏、酵母膏、蛋白胨、蔗糖、磷酸二氢钾(KH2P04)、硫酸亚铁(FeSO4)、硫酸镁(MgSO4)、氯化钙(CaCl2)10种发酵增效剂,通过Plackett-Burman试验设计进行增效剂筛选。结果发现,以B.subtilis、B.licheniformis D3与S.cerevisiae组成的混合菌种发酵小麦麸皮制备FOs的过程中不需要添加增效剂。1.3发酵条件的优化在前期试验的基础上,以小麦麸皮为基础培养基,以双波长法测定FOs产量,B.subtilis、B.licheiformis D3与S.cerevisiae以1:1:1的比例组成混合发酵菌种,针对发酵温度、发酵时间、接种量及料水比4个发酵条件,通过单因素试验对发酵条件进行初步筛选,确定响应面试验中4个发酵条件中心点,进一步通过响应面试验设计对发酵条件进行优化。获得的最佳发酵条件为:发酵时间58.5 h,发酵温度42.5℃,接种量10.7%,料液比1:1.16,在此发酵条件下得到的FOs的产量为1309.46 nmol/g,较未发酵小麦麸皮中FOs含量(207.5 nmol/g)提高了 631%。2小麦麸皮FOs的分离纯化工艺在前期试验的基础上,通过大孔树脂Amberlite XAD-2对混菌发酵小麦麸皮制备的FOs进行初步分离纯化。针对吸附上样液的浓度、pH和体积及解吸液的浓度、pH、体积,通过单因素试验进行初步筛选。结果发现,最佳小麦麸皮FOs上样液浓度为4 mg/mL,上样液pH为4,上样体积为40 mL,此时吸附率是83.76%;解吸时,最佳乙醇水溶液体积分数50%,洗脱体积为15 mL,此时解吸率是94.80%。3小麦麸皮FOs的体外抗氧化活性评价在前期试验的基础上,通过测定DPPH自由基清除能力、羟基自由基的清除能力和还原力,评价初步分离纯化的小麦麸皮FOs的体外抗氧化活性。结果发现:经Amberlite XAD-2初步分离纯化的小麦麸皮FOs,具有良好的还原力,对DPPH自由基和羟基自由基具有良好的清除作用,当小麦麸皮FOs溶液浓度为4 mg/mL时,体外抗氧化活性基本与标准品BHA相当。综上所述,B.subtilis、B.licheniformis D3和S.ceresiae以1:1:1 组成混合发酵菌种,最佳发酵条件为:发酵时间58.5 h,发酵温度42.5℃,接种量10.7%,料液比1:1.16;大孔树脂Amberlite XAD-2分离纯化FOs最佳条件为:上样液浓度4 mg/mL,上样液pH 4,上样体积40 mL,最佳解吸液为体积分数50%乙醇水溶液,洗脱体积为15 mL;初步分离纯化获得的小麦麸皮FOs能够有效清除DPPH自由基和羟基自由基,同时具有较强还原力。