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目的:探讨人脂肪源性间充质干细胞(human adipose-derived mesenchymal stem cells,hAMSC)分化为脂肪细胞过程中腺病毒36型(Adenovirus type 36,Ad36)对PI3K/AKT信号通路中的PPARγ及其下游脂肪细胞分化相关基因的调节作用。方法:(1)用腺病毒诱导hAMSC,RT-qPCR检测腺病毒标记基因E1A的表达水平,油红O染色检测细胞中脂肪的生成,RT-qPCR、Western Blotting检测脂肪细胞分化标志分子PPARγ,鉴定Ad36诱导分化的脂肪细胞模型。(2)RT-qPCR、Western Blotting方法检测脂肪细胞分化过程中,FoxO1、LPIN1、APM1、ACC、GLUT4基因表达水平的变化。(3)葡萄糖氧化酶法和甘油三酯终点法测定脂肪细胞培养基葡萄糖浓度及细胞内甘油三酯含量。(4)采用染色质免疫共沉淀实验检测FoxO1和PPARγ对靶基因的调节作用。(5)用渥曼青霉素抑制FoxO1磷酸化水平后,采用Western Blotting方法检测Ad36诱导的人脂肪细胞中PPARγ蛋白质表达水平,采用RT-qPCR方法检测脂肪细胞中lpin1、apm1、acc、glut4mRNA表达水平。结果:(1)Ad36能诱导hAMSC定向分化成人脂肪细胞,脂肪细胞分化标志分子PPARγmRNA和蛋白质表达水平较对照组显著升高(P<0.05),分化过程中培养基葡萄糖含量较对照组显著降低(P<0.05)、细胞内甘油三酯含量较对照组显著升高(P<0.05)。(2)Ad36诱导脂肪细胞分化过程中,LPIN1、APM1、ACC、GLUT4基因表达水平较对照组显著升高(P<0.05),FoxO1蛋白质表达水平与对照组相比显著下降(P<0.05),P-FoxO1蛋白质表达水平与对照组相比显著上升(P<0.05)。(3)染色质免疫共沉淀实验显示,FoxO1转录因子对PPARγ基因有转录调节作用,PPARγ转录因子对LPIN1、APM1、ACC、GLUT4基因有转录调节作用。(4)渥曼青霉素抑制FoxO1磷酸化水平后,PPARγ蛋白质表达水平与对照组相比显著降低(P<0.05),受转录因子PPARγ调控的LPIN1、APM1、ACC、GLUT4基因表达水平显著降低(P<0.05)。结论:Ad36通过调节PI3K/AKT信号通路中转录因子FoxO1和PPARγ,上调了下游脂肪细胞分化相关基因LPIN1、APM1、ACC、GLUT4的表达,促进了脂肪细胞的分化。