体外循环与非体外循环保存离体肺NF-KB及组织结构的差异性研究

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目的:模拟肺循环和心脏灌注离体肺,探索更加符合生理的保存方法,保护离体肺的器官活性、组织结构及正常功能,为肺移植患者提供优质肺源;探索不同的保存方法对离体肺的组织形态学、NF-KB的影响。方法:1、选用杂种犬离体肺组织,运用不同的灌注方法进行灌洗低温保存(体外循环机灌注、压力灌注、单纯低温保存),显微镜观察不同保存方法和不同时段的肺组织的组织形态学及其功能的变化;2、运用免疫组化检测不同保存方法和不同时段肺组织中的巨噬细胞NF-KB的活性;3、采用显微镜观察肺组织的HE切片,运用免疫组化半定量积分法计数肺组织中的巨噬细胞数量及其NF-KB阳性程度;结果:1、成功的组建了犬离体肺保护模型,通过三种不同的肺保护方法进行离体肺的保护(体外循环机灌注组、压力灌注组、单纯低温保存组)。2、通过观察病理HE切片,进行体外循环机灌注组、压力灌注组与单纯低温保存组三组相比较,发现体外循环机灌注组肺泡组织结构较完整,炎性细胞及渗出液较少,间隔稍增宽,压力灌注组次之,单纯低温保存组较差;组内对比可见,随着离体时间的增长,肺泡组织结构逐渐塌陷,炎性细胞及渗出增多,肺泡间隔逐渐增宽,肺泡腔内可见渗出液。3、通过观察病理免疫组化切片,进行体外循环机灌注组、压力灌注组与单纯低温保存组三组相比较,发现体外循环机灌注组巨噬细胞数量较少,NF-KB阳性程度较弱;压力灌注组巨噬细胞稍多,NF-KB阳性程度增强;单纯低温保存组巨噬细胞较多,NF-KB阳性程度较强。且随着离体时间延长,三个组内巨噬细胞数量增多及阳性程度增强。结论:1、体外循环机灌注能够更好的保护离肺组织,保留其结构和功能的完整性,压力灌注组次之,单纯低温保存组稍差;随着离体时间的延长肺组织结构和功能逐渐变差;2、体外循环机灌注组炎性反应较轻,巨噬细胞较少,压力灌注组组稍强,单纯低温保存组较重;随着肺离体时间延长,巨噬细胞数量增多活动增强。
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