【摘 要】
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目的:探究lncRNA CERS6-AS1/miR-125a-5p/BAP1轴在乳腺癌发生发展中的影响,并进一步探究其可能存在的分子机制。方法:将采用生物信息学分析方法、RNA pull-down技术、荧光原位杂交技术（FISH）和双荧光素酶报告基因实验预测并证实与miR-125a-5p的相互作用的lncRNA;qRT-PCR检测正常乳腺组织和肿瘤组织以及乳腺癌细胞中lncRNA、miR-125a
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目的:探究lncRNA CERS6-AS1/miR-125a-5p/BAP1轴在乳腺癌发生发展中的影响,并进一步探究其可能存在的分子机制。方法:将采用生物信息学分析方法、RNA pull-down技术、荧光原位杂交技术（FISH）和双荧光素酶报告基因实验预测并证实与miR-125a-5p的相互作用的lncRNA;qRT-PCR检测正常乳腺组织和肿瘤组织以及乳腺癌细胞中lncRNA、miR-125a-5p和BAP1的表达;裸鼠荷瘤实验用来验证lncRNA在体内调控乳腺癌生长的作用;细胞功能实验（EDU、流式测凋亡）检测lncRNA和miR-125a-5p对乳腺癌细胞的增殖凋亡的影响;蛋白质印迹法（Western Blotting）探究细胞中BAP1蛋白的表达量。结果:通过生物信息学分析发现lncRNA CERS6-AS1和miR-125a-5p存在结合位点;双荧光素酶报告基因实验和RNA pull-down表明lncRNA CERS6-AS1和miR-125a-5p可以结合;荧光原位杂交实验发现lncRNA CERS6-AS1在乳腺癌细胞中主要存在于细胞质中。通过使用qRT-PCR技术,我们发现在17对配对的乳腺癌组织及其癌旁组织中,lncRNA CERS6-AS1在肿瘤组织中明显高表达并和miR-125a-5p成负相关。体外实验发现,当lncRNA CERS6-AS1被敲减后,MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞的增殖能力明显下降,细胞凋亡比例明显增多;而当过表达lncRNA CERS6-AS1后,MDA-MB-231和MDA-MB-468细胞的增殖能力增强,凋亡细胞比例减少。体内实验证实,过表达lncRNA CERS6-AS1后,移植瘤的生长增快,体积及重量明显增大,移植瘤免疫组化显示,过表达lncRNA CERS6-AS1后,Ki-67及BAP1的表达增强。功能回复实验表明miR-125a-5p水平的恢复抑制了CERS6-AS1的增殖促进和抑制细胞凋亡的作用。结论:CERS6-AS1在体外促进乳腺癌细胞增殖,抑制凋亡,在体内能促进裸鼠移植瘤生长。并且作为ceRNA调控miR-125a-5p调节BAP1促进乳腺癌细胞增殖。
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