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目的:嗅觉介导素4(OLFM4)基因又称为GW112,hGC-1,在多种肿瘤中高表达,研究表明OLFM4在肿瘤发生发展中起重要作用,但结果并不一致,这显示OLFM4的作用存在细胞和组织特异性。本研究主要探讨OLFM4mRNA与核仁素(Nucleolin, C23或NCL)蛋白之间是否存在相互作用,以及核仁素对OLFM4转录水平的调控。方法:构建过表达核仁素质粒GC146-Ncl和阴性对照质粒GV-142以及敲低核仁素质粒pGenesil-1.1-Si和敲低阴性对照质粒pGenesil-1.1-HK,分别转染SGC-7901和293-T细胞,用western blot鉴定C23蛋白表达水平。将上述质粒分别与OLFM4-报告基因质粒共转染,分析核仁素对OLFM4活性的影响。收集SGC-7901细胞核染色质,孵育细胞核染色质和核仁素,进行蛋白质-RNA免疫共沉淀后,提取RNA,用RT-PCR检测与蛋白质结合的mRNA类型。结果:构建的过表达质粒GC146-Ncl和阴性对照质粒GV-142以及敲低(knock down)质粒pGenesil-1.1-Si和敲低阴性对照质粒pGenesil-1.1-HK,分别转染细胞,48h后荧光率达60%。western blot结果显示,核仁素过表达组中核仁素表达上调,核仁素敲低组中核仁素表达下调,分别与它们的阴性对照组相比。双荧光素酶报告基因实验结果显示,SGC-7901细胞中过表达质粒GC146-Ncl的相对荧光素酶活性约为对照质粒的1.15倍(P<0.05),敲低质粒pGenesil-1.1-Ncl的相对荧光素酶活性约为对照质粒的0.8倍(P<0.05);293-T细胞中过表达质粒GC146-Ncl的相对荧光素酶活性约为对照质粒的1.7倍(P<0.05),敲低质粒pGenesil-1.1-Ncl的相对荧光素酶活性约为对照质粒的0.5倍(P<0.05)。确定了合适的超声波破碎条件:即输出功率40%,每次1s,间隔30s,共30次。蛋白质-RNA免疫共沉淀后RT-PCR结果显示,扩增出OLFM4基因490bp片段和Bcl-2基因153bp片段。结论:核仁素与OLFM4mRNA可以相互结合,且核仁素可以通过增加OLFM4转录水平和延长OLFM4mRNA的半衰期来增加OLFM4mRNA的稳定性。