麝香配伍乳香促前列腺上皮屏障通透性的实验研究

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目的:确定麝香配伍乳香“开通走窜”功效具有促前列腺上皮屏障通透的作用;明确麝香配伍乳香“化瘀通络”功效对前列腺腺体炎症因子的调节作用并阐明分子机制。方法:实验一:麝香配伍乳香促前列腺上皮屏障通透性作用的实验研究,本部分以人前列腺RWPE-1细胞体外模拟人体前列腺上皮屏障在此基础上研究以麝香、乳香作为代表的芳香开窍药物对上皮紧密连接及通透性的作用,以不同浓度的含药血浆处理后,精确测定单层细胞跨膜电阻值(TEER)的改变幅度、LDH分泌量(评价细胞毒性)及酚红透过量的情况。实验二:麝香配伍乳香含药血浆对小鼠前列腺抗原诱导的单核细胞分泌炎症因子调控作用的实验研究,本部分以检测麝香配伍乳香含药血浆(DP-M&O)预处理后的单核细胞分泌炎症细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10水平的变化,了解麝香乳香在治疗前列腺炎中抗炎效果的机理。结果:实验一:经过麝香配伍乳香含药血浆处理后,细胞单层电阻TEER值降低,而且呈明显时效关系,以30-60min时间段下降最明显,且随着含药血浆浓度越高,下降趋势越明显,其中10%、20%DP-M&O处理后,在与对照组及其他浓度的含药血浆组的比较中显示其显著差异具有统计学意义;通过检测RWPE-1的LDH释放观察DP-M&O的细胞毒性,10%,20%浓度含药血浆对细胞单层细胞毒性与其他组比较差异有统计学意义,两组间比较差异无统计学意义,24h细胞毒性迅速升高,然后缓慢上升进入平台期,各浓度DP-M&O处理后,各时间点所检测的细胞毒性均在10%以下;酚红透过实验表明经过麝香、乳香含药血浆处理后,RWPE-1细胞单层通透性明显提高,10%、20%浓度麝香配伍乳香含药血浆能明显增加RWPE-1细胞单层通透性,与对照组相比其差异具有统计学意义。实验二:随着麝香配伍乳香含药血浆浓度增加,对TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8降低及IL-10升高作用更明显,呈剂量依赖性改变,在20%DP-M&O预处理后,TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8分别降低了74.4%、56.0%、76.6%、70.5%,IL-10上升了236.1%。结论:1.麝香配伍乳香具有促进前列腺RWPE-1细胞单层紧密连接的通透性的作用且细胞毒性在可接受范围内,在高剂量(10%-20%)含药血浆浓度时作用明显,但无剂量依赖性,24h时增加明显,随时间持续延长,促通透作用可缓慢上升。2.麝香配伍乳香可有效抑制CAP/CPPS中前炎症因子引起的炎症反应,显著下调PAgs刺激诱导单核细胞TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8等炎症因子的分泌及提高IL-10的水平,并呈剂量依赖性改变。
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