大负荷训练致大鼠蛋白尿发生时足细胞裂孔隔膜的变化及其机制

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目的:通过对大鼠进行大负荷训练干预建立持续运动性蛋白尿模型,从蛋白尿产生的结构基础裂孔隔膜出发,探索过度的运动应激对大鼠肾脏组织结构与裂孔隔膜超微结构的影响,并以其主要构成蛋白Nephrin为核心,探索超负荷训练周期大鼠发生持续性蛋白尿时裂孔隔膜异常的机制,为解释超负荷训练与运动性蛋白尿的关系提供实验依据。方法:研究一,Sprague-Dawley大鼠随机分为安静对照组(C组)、运动后30min取材组(EI组)、运动后24h取材组(EA组),运动组大鼠进行坡度为10%的6周递增负荷跑台运动,每周训练6天,末次训练后分别在30 min和24 h取材。检测大鼠尿液及血清指标,并观察肾组织形态和超微结构的变化。研究二训练方案同研究一,观察大鼠肾脏细胞凋亡及肾小球足细胞凋亡特征,检测尿液、血浆、肾脏相关机制指标。结果:(1)6周大强度训练致大鼠肾脏组织形态学及裂孔隔膜超微结构异常;运动组体重在第六周出现负增长;血清T/C出现先下降再上升,但EI、EA组均显著低于C组(p<.01,p<.05);EI、EA组SCr、BUN显著低于C组(p<.01),但仅SCr出现回调,EA组显著低于EI组(p<.01);运动后24 h内大鼠UTP、m Alb保持高水平状态,而24 h时有所下降。(2)6周大强度训练导致大鼠肾脏炎症因子TNF-α水平在24 h之内处于高水平状态,肾脏局部及循环血液中Ra、AngⅡ随休息时间的延长而增加,其中肾局部RAS变化更为明显,Nephrin蛋白表达持续低表达;(3)6周大强度训练致大鼠肾脏组织细胞凋亡增加,肾小球内部分足细胞出现明显的凋亡特征;PI3K/AKT通路活性无明显变化;EI、EA组Bax/Bcl-2比值均高于C组(p<.01),EA组Caspase-3显著高于C和EI组(p<.05)。结论:大负荷训练建立了大鼠持续性运动性蛋白尿模型,肾脏在组织形态学上表现出异常症状,肾脏裂孔隔膜的超微结构发生“类病理性”的改变。大负荷训练刺激大鼠肾脏局部和循环系统RAS持续活跃,其中肾脏局部RAS活跃更为明显,AngⅡ表达增加引起裂孔隔膜主要结构蛋白Nephrin在运动停止后24 h内表达量下降;Nephrin的持续低表达造成肾脏组织细胞凋亡的发生,而这可能并不是通过Nephrin调控的下游PI3K/AKT通路完成的。
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